液相/质谱使用经验分享

液相/质谱使用经验分享

高效液相色谱HPLC经验：

【1】泵压跳动，跳动范围10bar左右。

解决方法：

1、原先小白头有点脏，更换后尚未解决；

2、将主动阀上的阀芯取出后，发现有类似气泡存在，浸入甲醇-水溶液超声5min，以试着去除气泡，重新将其安装后再观察，仍未解决；

3、更换新的阀芯，将其安装后，不再有跳动，观察一段时间后比较平稳，成功解决。

【2】发生故障：

①plug homing over pressure

② 灌注及设流速时均无压力也不见液体流出

③检测器光闸不能复位④进完大浓度样品后，进空白相应位置也出峰。

可能原因：

①在线过滤器堵了

②泵头下单向阀堵了

③有可能是检测池脏了，也有可能是光路有点堵，再不行可能是灯寿命到了

④小抹布脏了，需要换

解决方法：

①在线过滤器卸下来，置烧杯，加纯化水煮沸5-10分钟后甲醇超一下一般就可以了，如果还堵的话就拿稀硝酸泡，还不行的话就换新的了，这本身是个消耗品

②把泵头下单向阀卸下来，两个都有可能堵，刚卸下来时竖着在耳边摇一摇是听不到声音的。简单的拿洗耳球把单向阀吹吹就行了（注意方向），吹了没反应可以拿溶剂超声，但不可水煮，一般超至在耳边摇能听见声音就不影响实验

③先用溶剂把检测池冲冲，用啥试具体样品而定；若冲了还不行，把检测池卸下，看灯能量，若能量还可以（有个几千），可能得清洗光路了。第一次清洗的话建议还是叫工程师来，因为待清理的部件在检测器的最下方，有一个黑色片片，中间有一条缝，而且那一块的螺丝都是八角的，卸起来很麻烦。

④把5个样品盘都拿出来，可以看见里面有一个黑色突起（看不清用手电筒），平时进样针就是从那个地方吸样的。手伸进去就可以卸下来，里面有一个小白圈圈（用多了自然就黑了），换一个新的就行了，买仪器时一般配有10个。

液质联用定量经验：

1、要用目标离子的碎片定量，特征性强，排除干扰；

2、在定量分析的方法设置上，尽可能提高扫描速率，提高准确率和重复性（可以通过a减小扫描质量数的范围来提高目标峰的扫描次数，或 将一个样品全部分析时间断分成n个segments，对目标离子单独设置扫描模式）；

3、一定要通过色谱柱分离后定量分析，避免竞争性离子的存在影响目标离子的离子化效率；如果目标分子未与竞争性分子完全分开，则在离子化过程中导致目标分子的离子化效率降低，导致样品分子的定量结果偏低，当然标准浓度的样品也要用相同的方法分析。

4、如果样品都是纯品的话可以不经过色谱柱直接进样分析，包括做标准曲线的样品（虽然不建议直接进样分析）。

5、如果用的离子源的喷针位置是可移的话，一定要记住做标准曲线时其位置，否则其位置移动后在相同的条件下进入质谱的离子流量会发生改变，标准曲线就不能使用了！对于调用的质谱方法不要改动shealth gas and aux gas 的流速，否则会影响进入质谱的样品量。

6、所建立的标准曲线一个月后如果想重复使用，则用QC样品检验一下该标准曲线！

7、对于已经建立好的分析方法在扫描范围、流动相的组成、梯度或流速等方面不要作任何改动，否则，标准曲线要重作。扫描范围改变目标峰的扫描次数、流动相组成改变离子化效率，流速改变色谱峰的保留时间和峰宽。

8、离子阱的强项在于多级－定性，四级杆的强项在于定量；

9、对于热稳定性不好的样品可以通过提高气速，降低毛细管温度的方法保证定量分析的重复性；一旦方法固定后不要轻易改动。