当您开发分析方法时，是否遇到过这样的问题：
化合物分离困难，分析耗费时间长，工作效率低；
易水解化合物、互变异构体难以分析；
反向色谱不适用，必须用毒性较大的正相色谱
……
作为一名天天与各种样品打交道的分析方法开发工程师，经常会遇到这样让人头疼的问题，直到实验室引进了超高效合相色谱。
图1. 超高效合相色谱
超高效合相色谱（ACQUITY UPC2），在色谱分类上属于超临界流体色谱，采用超临界二氧化碳作为流动相。之前实验中难分离的样品，使用超高效合相色谱就可以进行快速分离，不仅分离度好，而且峰形尖锐、灵敏度高，分析时间还特别短。话不多说，一起来看看超高效合相色谱的分离实力吧！
紫杉醇定量分析
作为一种抗肿瘤药物，紫杉醇可以用于治疗多种癌症。用反向色谱法对紫杉醇进行分析时，存在分析时间长（约80 min)、紫杉醇同杂质之间分离度差的问题（图2），因为紫杉醇峰与紫杉醇杂质II峰之间难以分离，药典仅要求其分离度应大于1.2。
图2. 使用传统方法分析紫杉醇谱图。
这套分析方法不仅耗时长，且会使得开发工程师怀疑分析数据是否有用。于是开发工程师尝试着用超高效合相色谱（ACQUITY UPC2）分析中间三个分离困难的化合物混标，结果如下：
图3. UPC2系统分析紫杉醇与两种杂质分离谱图
不稳定化合物分离
二环己基碳二亚胺用于阿米卡星及氨基酸的合成脱水，也是一种具有基因毒性的化合物。所以在药物中需要严格控制其含量，此外，因其本身化学性质不稳定，极易水解，故常规反相液相分析方法不适合对其进行定量分析。
如果直接用UPC2系统分析样品，既避免了水的使用，又保证了DCC不发生分解；同时，可串联QDa使用，定量限达到2 ppb浓度，完全满足实际样品的定量需求。
图4. UPC2系统定量分析二环己基碳二亚胺
手性异构体分离
兰地洛尔用于治疗手术时心动过速性心律失常，共有三个手性异构体杂质，其分离具有很大的挑战，通常会用正相色谱方法。而正相色谱方法分析时间较长（60 min)，峰型拖尾严重，异构体III不能准确定量（图5）。
图5. 正相色谱分析兰地洛尔谱图
而使用UPC2系统，11分钟就可轻松搞定这些难题。
图6. UPC2系统分析兰地洛尔
在经过一段时间的使用后，开发工程师发现UPC2系统具有与反向色谱系统互补的选择性，且因为超临界流体跟液体相比黏度更低、扩散性更高，再加上UPC2系统的低系统体积和扩散体积，其具有分析速度快、分离度更好的特点。并且，因为流动相主要是超临界二氧化碳，绿色无毒，使用系统进行分析时产生的有机废液更少，更加环保。
那么，如何辨别您是不是
需要用超临界流体色谱分析呢
So easy！
用常规的反相色谱方法难以分析的样品，
去试试超临界流体色谱吧！
怪不得现在实验室的开发工程师
遇到反相色谱分不开的样品，
都不慌不忙，
原来还有秘密武器可以用呢！
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