DMPK专栏 | 使用 Strata® DE 固相支撑液液萃取 (SLE) 从血浆中净化碱性药物

摘要

制药行业内的生物分析实验室，例如 DMPK 实验室，一直面临着从血浆或组织等生物样品中分离专有药物（通常是基本药物）的挑战。有许多可用的净化技术，有时很难在速度（允许高通量设置）和清洁度（导致改进的下游色谱法）之间做出选择。在本技术说明中，固相支撑液液萃取与 LC-MS/MS 相结合，以有效地从血浆中提取一种基本药物，证明了这种净化技术在生物分析药物分析中的适用性。

关键词：碱性药物；SLE；LC-MS/MS；

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样品信息

碱性药物

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实验部分（仪器、试剂与材料）

1

主要仪器设备

API4000 QTRAP 三重四极杆质谱（AB SCIEX）

2

试剂材料

乙腈、甲酸质谱纯；空白血浆

3

样品预处理

用 140 μL 2% NH4OH 和 10 μL “基本药物 A”加标溶液 (1 μg/mL) 稀释 150 μL 血浆

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SPE条件

4

LC-MS/MS色谱条件

色谱柱：Kinetex 2.6 μm Biphenyl (50 *2.1 mm, Phenomenex)

流动相A：0.1%甲酸水溶液

流动相B：0.1%甲酸乙腈溶液

流速：500 μL/min

柱温：40 ℃

进样量：5 µL

流动相梯度：见表1

表1 流动相梯度表

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实验结果

由于制药实验室中的许多药物是专有的，我们选择分析一种具有代表性的药物“基础药物 A”，它包含一个胺基和疏水环结构，这两种结构都是大多数药物所共有的。在开发我们的 SLE 净化方法时，我们还选择使用可自动化的 96 孔板格式，使其成为高通量处理的理想格式。表 1 显示了“基本药物 A”的回收值和 %CV。这种方法表明它是准确和精确的。回收率百分比基于基质匹配标准。图 1 提供了提取样品的代表性色谱图。

表2 绝对回收率和 % CV

图1 使用 Strata DE SLE 净化后提取的色谱图

结论：

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使用 Strata DE 的 SLE 程序简单快捷，除了筛选洗脱溶剂外，只需要很少的方法开发。得到的干净样品表明该技术是生物分析实验室的理想选择，因为它速度快、可扩展以实现高通量，并产生几乎没有干扰的干净样品。

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