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久违的数据分享时间到了,今天给大家带来3个参照《中国药典》2020版分析的中药数据(银杏叶、连翘和姜黄),感兴趣的用户请收藏保存,以便随时查阅。
# 01 银杏叶片的分析
客户提供银杏叶片供试品与混合对照品(含槲皮素、山柰酚与异鼠李素),希望照20版药典银杏叶片项下分析方法,获得良好的分析结果。
我们使用CAPCELL PAK C18 AQ S5; 4.6mm i.d.×250mm色谱柱进行分析。结果如图1、表1所示,在供试品谱图中的三种待测物的分离度分别为1.92、5.70与2.81,理论塔板数分别为10894、13870与9329,满足药典的要求。
图1银杏叶片供试品及混合对照品分析结果谱图
表1 银杏叶片供试品分析结果数据
【色谱条件】
色谱柱:CAPCELL PAK C18 AQ S5;
4.6mm i.d.×250mm(F92045)
流动相:甲醇 / 0.4%磷酸溶液 = 50 / 50
流 速:1.0 mL/min
柱 温:30 °C
检 测:PDA 360nm
浓 度:客户提供银杏叶片供试品与混合对照品
进样量:10 µL
# 02 连翘的分析
客户提供了连翘样品,希望参考20版药典的分析方法,筛选出合适的色谱柱,符合药典规定,同时使主成分峰形良好。
连翘苷的测定
我们使用CAPCELL PAK C18 MGII S5; 4.6mm i.d.×250mm色谱柱进行分析。结果如图2、图3所示,在对照品溶液中连翘苷的理论塔板数16942,拖尾因子1.034,供试品溶液中主峰和杂质峰能够很好的分离。
图2 连翘苷对照品分析结果
图3 连翘苷供试品分析结果
【色谱条件】
色谱柱:CAPCELL PAK C18 MGII S5;
4.6 mm i.d. × 250 mm(F92533)
流动相:乙腈 / 水 = 25 / 75
流 速:1 mL/min
温 度:35 °C
检 测:PDA 277 nm
浓 度:对照品溶液的制备:取连翘苷对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1mL含0. 2mg的溶液,即得。
供试品溶液的制备:取本品粉末(过五号筛)约2g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25mL,称定重量,超声处理(功率250W,频率40kHz)25分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液10mL,置 25mL量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
进样量:10 µL
连翘酯苷A的测定
我们使用CAPCELL PAK C18 MGII S5; 4.6mm i.d.×250mm色谱柱进行分析。结果如图4、图5所示,对照品溶液中连翘酯苷A的理论塔板数12076,拖尾因子1.021,供试品溶液中主峰和主峰前杂质峰之间的分离度为1.249,我们可以通过适当提高温度,或者降低有机相的比例来提高主峰和杂质间的分离度。
图4 对照品分析结果(35℃)
图5 供试品分析结果(35℃)
【色谱条件】
色谱柱:CAPCELL PAK C18 MGII S5;
4.6 mm i.d. × 250 mm(F92533)
流动相:乙腈 / 0.4%冰醋酸溶液 = 15 / 85
流 速:1 mL/min
温 度:35 °C
检 测:PDA 330 nm
浓 度:对照品溶液的制备:取连翘酯苷A对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1ml含0. lmg的溶液,即得(临用配制)。
供试品溶液的制备:取本品粉末(过五号筛)约0. 5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入70%甲醇15ml,密塞,称定重量,超声处理(功率250W,频率40kHz)30分钟,放冷,再称定重量,用70%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
进样量:10 µL
我们尝试将温度升高到40℃进行测试,因为随着温度的升高,主峰和杂质峰之间的分离度增大。将温度升高到40℃时,主峰和杂质峰之间的分离度为2.041。
图6 供试品分析结果(40℃)
【色谱条件】
色谱柱:CAPCELL PAK C18 MGII S5;
4.6 mm i.d. × 250 mm(F92533)
流动相:乙腈 / 0.4%冰醋酸溶液 = 15 / 85
流 速:1 mL/min
温 度:40 °C
检 测:PDA 330 nm
浓 度:药典方法
进样量:10 µL
我们也尝试将有机相比例降低进行测试,随着有机相浓度的降低,主峰和杂质峰之间的分离度增大。将有机相比例降到14%时,主峰和杂质峰之间的分离度为3.322,结果如图7所示。但随着有机相比例的降低,保留时间有大幅延长,在有机相仅有1%变化时,保留时间延长10min以上,因此在不同仪器分析时,可能由于泵混合体积不同而导致保留时间或分离差异,建议根据实际分析情况,微调流动相条件。
图7 供试品分析结果(14%有机相)
【色谱条件】
色谱柱:CAPCELL PAK C18 MGII S5;
4.6 mm i.d. × 250 mm(F92533)
流动相:乙腈 / 0.4%冰醋酸溶液 = 14 / 86
流 速:1 mL/min
温 度:35 °C
检 测:PDA 330 nm
浓 度:药典方法
进样量:10 µL
# 03 姜黄的分析
本实验室参考20版药典的分析方法,使用CAPCELL PAK C18 MGII色谱柱对姜黄中的姜黄素进行分析,符合药典规定,同时主成分峰形良好。
对照品溶液中姜黄素的理论塔板数19815,拖尾因子1.102(图8黑色线条);供试品溶液中主峰和杂质峰的分离度3.222(图8绿色线条),分析结果如图8和表2所示。
图8 姜黄素对照品和供试品分析结果
表2 姜黄素供试品中各峰积分结果表
【色谱条件】
色谱柱:CAPCELL PAK C18 MGII S5;
4.6 mm i.d. × 250 mm(F92533)
流动相:4%冰醋酸溶液 / 乙腈 = 52 / 48
流 速:1.0 mL/min
温 度:25 °C
检 测:430 nm
浓 度:对照品溶液的制备:取姜黄素对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1 mL含10μg的溶液,即得。
供试品溶液的制备:取本品细粉约0.2g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇10 mL,称定重量,加热回流30分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,离心,精密量取上清液1 mL,置20 mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。
进样量:5 µL
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