前言
近年来，随着医药产业的快速发展和公众对药品安全认知水平的不断提升，加强对中药外源性有害物质的控制，建立有关标准已成为满足药品监管需求、保障公众用药安全的重要手段。中药材大部分来源于植物和动物，在种植（养殖）过程中不可避免地会发生病虫草害，需要使用农药进行防治；而使用农药不意味着滥用农药，国家对于高毒、高残留、高安全风险的化学农药出台了禁用名单，需要首先加以监控。
在参考了我国农业农村部自2002年至今发布过的化学农药禁限用公告后，《中国药典》2020年版经剔除杀鼠剂、重金属类农药、熏蒸剂、多异构体、难以获得对照品及难以采用常规气质、液质测定的农药品种后，总计 33 种农药 55 个化学单体作为禁用农药检测品种的检测指标。
本文参考2020版《中国药典》2341 通则中的第五法使用LabTech SPE 1000全自动固相萃取系统对常用果实类药材枸杞中的农药残留进行固相萃取，分别采用GC-MS、LC-MS检测，建立了一套中药农残的处理检测方法，采用HLB柱净化样品，此方法回收率及平行性良好， GC-MS组和LC-MS组分别为74.7%~112.5%和77.1%~110.4%，重复性RSD分别为0.7%~9.3%和1.8%~9.0%，均满足药典要求。
关键词：SPE 1000 MultiVap-10 EV400VAC 2020版《中国药典》 农药残留 2341通则第五法 枸杞
1、仪器设备及试剂
1.1.1 SPE 1000全自动固相萃取系统（莱伯泰科公司）；
1.1.2 7890B-5977B气相色谱质谱联用仪（安捷伦公司）；
1.1.3 SCIEX Exion LC™液相系统+ Triple Quad™ 4500质谱系统（SCIEX中国公司）；
1.1.4 Flex-MVP全自动高通量真空平行浓缩仪（莱伯泰科公司）；
2、实验方法
称取枸杞样品5g，加氯化钠1g，摇散后加入乙腈50mL，匀浆处理2min（每分钟不低于12000转），离心5min（每分钟4000转），取上清液，沉淀再加入50mL乙腈匀浆，离心，合并两次上清液，放入全自动高通量真空平行浓缩仪上，按38℃水浴加热、200rpm转速、100真空度平行浓缩至3~5mL后，用乙腈定容至10mL。
将2.1样品各取3mL放入SPE 1000全自动固相萃取系统，按照图1所示的方法进行样品的固相萃取净化步骤，收集净化液。
图1 HLB柱固相萃取流程
基质加标配制：按照2.2制备空白基质溶液，各取1mL（每种方法所得样品平行3份）至MultiVap-10全自动高通量平行浓缩仪上，40℃浓缩至约0.6mL，加入20μL混标工作液，加乙腈定容至1mL，混匀。
按2.1方法准备样品，进行加标实验，5g样品加标1μg，然后按照2.2方法进行实验，同时进行6个平行样品，用来测定加标回收率及平行性。
取处理好的样品溶液（或基质混标溶液）1mL，GC-MS法精密加入内标0.3mL，LC-MS法精密加入水0.3mL，混匀待测。
色谱柱：Agilent DB-5ms毛细管柱：30 m*250 μm*0.25 μm；
进样口温度：270℃；
柱温程序：初始温度100℃，以5℃/min升至180℃，保持5min，然后以5℃/min升至220℃保持6min，再以10℃/min升至280℃，保持5min；
进样量：1 μL；
进样方式：不分流进样；
流速：1.0mL/min；
离子源温度：280℃；
辅助加热温度：290℃；
溶剂延迟：3min；
扫描方式：全扫描（SCAN）方式用于定性/选择离子扫描模式（SIM）用于定量；
色谱柱：Shim-pack Velox C18（2.7μm，2.1*100mm）；
流动相：A: 0.1％甲酸溶液（含5 mmol/L 乙酸铵）；B:乙腈-0.1％甲酸溶液（含5 mmol/L乙酸铵）（95:5）；
流速：0.4 mL/ min；柱温：40℃；进样量：2 μL；
洗脱梯度：0~1min，30%B；7min~8min，100%B；8.1~10min，30%B；
离子源：ESI源，正离子模式；
离子源参数：
IS电压：5500V 气帘气CUR:30 psi；
雾化气GS1:55 psi 辅助气GS2:55 psi；
源温度TEM:550 ℃ 碰撞气CAD: Medium；
3、结果与讨论
图2 标准工作液GC-MS选择离子流色谱
图3 基质加标GC-MS选择离子流色谱图
图4 标准工作液LC-MS总离子流色谱图
图5 基质加标LC-MS总离子流色谱图
表1 33种农残GC-MS法加标回收率
表2 30种农残LC-MS法加标回收率（HLB柱固相萃取法）
4、结论
由表1、2可知，2020版《中国药典》2341第五法中HLB柱固相萃取的加标回收率在GC-MS组为74.7%~112.5%，重复性RSD为0.7%~9.3%，LC-MS组HLB柱固相萃取的加标回收率为77.1%~110.4%，重复性RSD为1.8%~9.0 %，均满足药典要求。
综上所述，莱伯泰科SPE 1000全自动固相萃取系统、全自动高通量真空平行浓缩仪能够高效、稳定地达到实验的要求，适用于2020版《中国药典》2341第五法中规定的中药农残测定，适用于中药枸杞样品的前处理实验。
参考文献：
[1] 中华人民共和国药典2020年版. 四部［S］.2020: 30ChP 2020. Vol Ⅳ［S］. 2020: 30.
[2] 申明睿,翟为民,何轶,石上梅,杨昭鹏,兰奋.《中华人民共和国药典》2020年版中药禁用农药残留限量标准的研究思路[J].药物分析杂志,2020,40(11):2075-2081.
关于莱伯泰科
北京莱伯泰科仪器股份有限公司（股票代码：688056.SH）成立于2002年，是一家专业从事实验分析仪器的研发、生产和销售的科技型公司。公司自成立之初便专注于科学仪器设备的研发，立志为环境检测、食品安全、医疗卫生、疾病控制、材料研究等众多基础科学及行业应用提供实用可靠的实验室设备和整体解决方案。公司发展至今已拥有各类专利及软件著作权100余项，持续通过高新技术企业认证，连续多年被业内媒体评为中国仪器仪表行业“最具影响力企业”，是全球范围内能将多种类和多功能的样品前处理技术与全自动实验分析检测平台组合成全自动实验分析仪器系统的主要实验分析仪器供应商之一。
公司拥有LabTech、CDS、Empore等行业知名品牌，在中国和美国设有研发和生产基地，并在中国内地主要城市、中国香港、美国马萨诸塞州和宾夕法尼亚州等地设有产品营销和服务中心。公司产品服务涵盖实验室分析仪器、样品前处理仪器、实验室设备、医疗设备、实验室耗材和实验室工程建设等，可为全球多种类型用户提供从实验室建设到样品分析的一站式解决方案。目前，公司产品已销往全球90多个国家和地区，累计服务客户3万余家。
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