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在日常的内毒素检测中,我们经常会遇到结果异常或失败, 常见为空白孔反应、标准曲线失败和CV%值超标。
今天我们来聊聊,针对以上这些,在日常的内毒素检测中,该怎么应对?
空白孔反应是分析方法失败常见原因之一
移液过程中,避免灰尘、毛发、皮肤细胞和其他颗粒物对反应孔造成污染
样品准备时,移液吸头不应经过空白孔或阴性对照孔
制备标准品时,确保充分混匀,保证最低浓度点和空白点有浓度差
切勿使用可能被污染的LAL试剂水制备空白孔
通过使用可靠厂商的试剂耗材,进一步降低污染的可能性
这类实验的失败通常与实验人员和移液过程相关
标准品制备过程中正确使用已校准的移液器和匹配的吸头
实验人员需专注于标准品、样品制备和96孔板制备过程(*非常重要)
添加鲎试剂时推荐使用多通道移液器降低方法变异性
在空白、阴性对照或内毒素含量较低的样品孔中,常常可能发生热孔或单孔污染。通常表现为复孔中一个较另一个相比,有明显的高内毒素信号。“热孔”确切原因尚不清楚,如果确认多次的重新测试是由于96孔板的原因,建议更换新批次的96孔板。
以上所提到的情况中,大多数与人工操作有关,Lonza的PyroTecTM PRO 系统是一个灵活、强大和用户友好的自动化细菌内毒素检测系统,能有效减少人工手动过程中的移液和加样错误,大大降低实验人员操作时间、提高实验效率。
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