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同行说 | 与Digital Western一起探寻干细胞奥秘

ProteinSimple
2022.9.15

余青桐

江苏大学药学院 助理研究员

本研究中共涉及15个指标,样本类型包含细胞和组织裂解液。其中多数指标需检测磷酸化水平,这对于样本质量及数量要求均较高,所有结果的获取只用了2天,而传统方法则需至少2月,且样本需要反复制备。可以说Digital Western仪器突破了传统技术耗时长、样本大、可重复率低的三大痛点,大大提高了实验效率。定量分析更加标准化,更加客观,实验结果更易被杂志接收。

作为严重的中枢神经系统疾病,脊髓损伤仍是毁灭性事件,外伤性脊髓损伤常会造成重度和永久性残疾,患者往往丧失行动能力,目前临床尚无有效的治愈方法。日前,本课题组在ACS Applied Materials & Interfaces杂志上发表了题为LBO-EMSC Hydrogel Serves a Dual Function in Spinal Cord Injury Restoration via the PI3K-Akt-mTOR Pathway的研究成果,揭示了枸杞寡糖(LBO)与鼻黏膜间充质干细胞(EMSCs)通过双向调节能力修复大鼠脊髓损伤模型,为脊髓损伤修复奠定理论基础,同时也为糖类和干细胞的联合治疗策略提供新思路。

本研究通过使用全自动毛细Digital Western分析系统研究LBO,EMSCs及小胶质细胞三者间的相互关系,进一步探究内在机理发现LBO对EMSCs有驯化作用,增强其旁分泌效应;同时,LBO也可促进损伤部位的小胶质细胞向M2型转化,这种双向调节作用属首次发现。本研究中,我们团队主要使用Wes(全自动毛细管Digital Western型号之一)做了两方面的工作:

LBO对EMSCs驯化作用的机理探究;

LBO-EMSC对小胶质细胞极化作用的机理研究。

结果表明,LBO主要通过激活TNFR2-PGE2通路及促进下游相关关键分子的磷酸化,如Erk,MAPK,Akt及NF-kB,增强EMSCs的旁分泌作用,从而分泌更多生长因子促进脊髓损伤修复。同时,LBO-EMSC还可通过激活PI3K-Akt-mTOR促进小胶质细胞的M2极化,为脊髓损伤修复创造了良好的免疫微环境。

与传统的蛋白质免疫应迹(Western blot)技术相比Wes只需要0.5 μl的样本量就可开展实验,且重复性更高、速度更快。本研究中共涉及15个指标,样本类型包含细胞和组织裂解液。其中多数指标需检测磷酸化水平,这对于样本质量及数量要求均较高,所有结果的获取只用了2天,而传统方法则需至少2月,且样本需要反复制备。可以说Wes仪器突破了传统技术耗时长、样本大、可重复率低的三大痛点,大大提高了实验效率。定量分析更加标准化,更加客观,实验结果更易被杂志接收。

干细胞研究是目前世界生命科学中最前沿、最尖端的研究领域之一。通过细胞的自我修复、自我治疗机制可帮助人类平衡免疫能力、改善慢性疾病。2012年,全球首款MSC药物Prochmal获批上市用于治疗儿童移植物抗宿主病(GVHD);截至2022年1月4日,全球登记的干细胞临床研究项目共计6065项,其中,美国干细胞临床研究项目数量达到2865项;中国、法国和德国的干细胞临床研究项目数量分别为659项、378项和329项;在2020年2月至6月新冠大流行时期,我国紧急启动基于间充质干细胞治疗重症肺部感染相关临床研究多达29项。2020年1月10日,多个国内单位联合完成的“异体间充质干细胞治疗难治性红斑狼疮的关键技术创新与临床应用研究”荣获国家技术发明二等奖。由此可见,干细胞必将成为新一代的生物技术药物服务于临床,并将为人类开启一个年轻、健康、长寿的崭新时代。

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