在生产用于防治传染病的病毒疫苗、细胞与基因治疗病毒载体等生物制品的下游生物工艺中，由宿主细胞产生的DNA杂质可利用Benzonase®核酸酶处理后去除。
Benzonase®是一种由NucA编码的内切酶，也是产品生产过程中与工艺相关杂质（必需的添加物）。残留的核酸酶可能对病人安全产生不利影响，因此，监管机构规定，核酸酶需被去除。通常使用ELISA方法进行去除，然而，生物制品生产过程中其他工艺相关杂质，也可能与ELISA抗体发生非特异性结合，从而降低检测和定量的准确性。因此，不能盲目相信ELISA结果。
实验人员可利用全自动毛细管Digital Western技术平台（即Simple Western）进行全自动高灵敏定量检测核酸酶残留。也可利用该技术平台对ELISA检测进行实验确认。
检测核酸酶残留优势
全自动毛细管Digital Western技术平台
1
自动化 + 标准化 = 重复性好
避免ELISA工作流程中过多手动操作步骤而引入的人为误差；
2
可视化分子量
避免ELISA抗体发生特异性结合，从而降低检测和定量准确性；
3
样品量少
仅需3 μL即可测定一个样品；
4
使用全细胞裂解液即可测定；
5
安全环保，不产生大量废液。
定量检测HEK293T
全细胞裂解液中核酸酶残留
全自动毛细管Digital Western技术平台
· Benzonase表观分子量为36 kDa；
· 所有样本中，HEK293T全细胞裂解液浓度为10 μg/mL；
· 随着Benzonase浓度降低，化学发光信号减弱；
· 样本回收率在91.9%~106.4%之间。
· 检测分析High QC和Low QC样本：Benzonase浓度分别为400 ng/mL和10 ng/mL；
· 样本回收率在91.4%~110.8%之间。
· 定量下限测试：Benzonase浓度分别为1、 0.9和0.8 ng/mL；
· 样本回收率在82.4%~104.5%之间。
参考文献：
1. Guidance for Industry: Characterization and Qualification of Cell Substrates and Other Biological Materials Used in the Production of Viral Vaccines for Infections Disease Indications, U.S. Department of Health and Human Services, Food and Drug Administration, Center for Biologics Evaluation and Research, 2010
2. Benzonase® ELISA Kit II, User Guide, EMD Millipore
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