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当分析方法开发研究员拿到一个没有参考方法的任务的时候，尤其当一些通用方法对目标物的分离没有太多帮助的时候，借助ACD AutoChrom内嵌的工具可以为自己找到一些有用的起点线索。接下来我们以图1丁苯酞的有关物质研究为例，来介绍一下ACD/AutoChrom 里的一些对寻找起点有用的组件。
图1 丁苯酞以及其类似物
01
用pH Selector 组件绘制
pH-logD曲线进行判断
ACD/AutoChrom 内有pH Selector 小工具，顾名思义这个工具首先能够辅助进行pH的选择，如果研究员对色谱柱保留能力以及改变保留的添加剂有所了解的话，还能一并对合适的色谱柱类型进行选择。直接绘制API和两个杂质的结构，通过pH Selector 进行计算。图2为丁苯酞及其异构体的疏水性情况，三个物质，仅有两条线段，其中两个异构体的logD计算值重合，这一点提示分离化合物2，3的难度大，靠疏水性的区分力来分离恐怕无能为力。而C18类色谱柱是以疏水性的选择性为主的。
图2 丁苯酞及其异构体的pH-logD曲线
从计算logD考虑疏水选择性出发来看，只能预判两个异构体杂质的疏水性低于API，以普通C18类色谱柱进行分离，预计不会有很好的分离效果。丁苯酞及其有关物质的pH-logD曲线也显示表示化合物完全是中性，pH不会带来任何选择性。
02
用保留预测软件进行保留时间判断
ACD/AutoChrom 内有保留预测建模软件ChromGenius。ChromGenius在进行保留时间预测时，不仅仅考虑疏水性，而且会考虑氢键，极性表面积，分子体积的大小，用多元回归的方式进行保留时间的预测。在对目标物进行保留时间预测时，并不用训练集的所有的分子，而是基于与目标物的分子的相似性，选择最接近的分子来建回归模型，再对目标分子的保留时间进行预测。
ChromGenius内建有10个方法模型，共有五种色谱柱（类型包括普通C18，极性嵌入C18 Aqua 柱， 氟苯基柱和氰基柱）和两种pH ( 2.7 ,8 )，流动相为乙腈。这10个模型都用接近200个化合物进行训练。
► 使用时直接画好目标物的结构，调入10个方法形成的方法库文件，即可进行预测。
► 对10个方法进行结果查看，可以发现这是个模型方法对目标物的分离效果都无法达到基线分离，两个杂质依然会共流。
其中氰基柱下甲酸流动相下分离度最佳，如果进行合控或者串联色谱分析，可以作为候选。
03
搜索分析方法数据库寻找有用的参考方法
ACD/AutoChrom 内有一个应用方法数据库Application Database，内含有一万多个分析方法。其中可能有某些方法对这种异构体的分析有所帮助。进行检索时需要应用一些技巧。直接使用丁苯酞的结构进行Exact search, 显然不能命中任何方法。
较为有效的搜索方法如下：
► 此时应使用子结构检索（SS Search），而且检索时注意将必要的氢原子画出来。
► 对数据库进行搜索后，如果没有发现合适的命中，也可以将部分原子进行变化，重新搜索。
► 搜索命中一部分结构后，可以继续对搜索结果进行再次搜索，以求得交集
► 以平铺模式进行搜索结果的查看
► 搜索到的参考方法都是气相色谱方法
04
色谱柱数据库的搜索
以上的三种方法都给出一定的线索，但是都未能找到根本解决问题的方案。在没有明确可用的参考方法的情况下，科学家需要进行筛选工作，为减少无效筛选，研究员需要对色谱柱进行精挑细选。
通常我们认为，体积效应强的色谱柱，能够对物质的形状和形态有更高的敏感度，从而对本例中目标对象有不错的选择性。
ACD/Column Selector 有数百根色谱柱的相关知识，其S项的测量是用苯并菲的保留因子除以邻三联苯的保留因子。
► 此时可以对色谱柱数据库进行数据过滤，找到体积选择性大于2的色谱柱。
► 选择User Define Filter
► 共计有66根色谱柱的体积选择性在2之上
研究员可以基于以上的色谱柱的线索对自己手边的色谱柱进行挑选，进行色谱柱筛选。
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总 结
本文未能为丁苯酞的有关杂质的分离提供一个绝对可用的方法，而是通过对一些知识库的搜索和查询获得了一些知识，而这些知识构成的空间将帮助研究者去规避错误失败空间，尽快找到有效的可用空间而提供线索。
当我们用知识画了一个圈，期望正确答案就在其中。
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