艾思吉实验室小故事
杜仲配方颗粒——
提高理论塔板数的2种解决方案
故事发生在风光正好的初夏里
一位忧伤的小仙女找到了艾思吉
小仙女，窗外风光甚好，你在这愁啥呢？
艾思吉老师，我在做杜仲配方颗粒含量测定项目，把实验室的色谱柱都试一遍了，可是对照品溶液中目标化合物松脂醇二葡萄糖苷的理论塔板数都不符合要求，最好的一个也才八千多，标准中要求大于10000。
小仙女别着急。容我想想……是不是采样点数不够啊，你把采样频率调大试试。
几乎没有什么变化呢。
emm…看来不是因为这个，是不是条件不合适。你试试提高柱温，看看有改善嘛。
40度条件下理论塔板数没有明显变化，但峰型变好很多。
看来不同柱温对理论塔板数也影响不大。既然40度条件下，峰型更佳，那后续就在40度柱温条件下优化吧。
好的。对了，艾思吉老师。奇怪的是同一个条件下，供试品溶液中松脂醇二葡萄糖苷理论塔板数能达到一万呢。
对照品溶液和供试品溶液的溶剂一样吗？
我看看啊……不一样，对照品溶液溶剂是纯甲醇，供试品的提取溶剂是70%甲醇。
那流动相呢，流动相条件是什么？
甲醇-水（25:75）
emmmm......
艾思吉老师您是不是有新的思路了。
是不是过载，又或者是不是溶剂效应呢？这样，先试一下降低进样量；再试一下进样量不变，对照品溶液的溶剂换成70%甲醇？
哇塞，果然有效。
看来还真的是溶剂效应。
溶剂效应
目前公认的对溶剂效应的理解是样品溶剂洗脱强度大于流动相洗脱强度时产生的色谱峰变形的现象。比如100%纯乙腈溶解样品，注入流动相为乙腈-水（18：82）的反相系统中，会造成色谱峰分叉或前延的现象。但是这种概念不能解释其他由于所选稀释剂导致的峰变形现象。所以我们将溶剂效应的概念延伸，溶剂效应，就是由于样品中某些组分在样品溶剂与流动相所处的状态的较大差异导致的色谱行为表现异常的情况。
但是，药典要求不允许更改溶剂，也不能改进样量呢。
那可以试试使用仪器上的Co-injection进样模式。
Co-injection 模式
此模式相较传统直接进样（标准模式）可以在不改变样品溶剂条件下去除溶剂效应，改善峰型，提高定量灵敏度。尤其当样品溶液为高比例有机溶剂时，可以直接进样分析而无需担心溶剂效应。
哇塞，Co-injection模式进样果然也同样有效。这个方法不错，不用改溶剂，只需要在软件上简单设置就行了。十分感谢，帮我解决了大问题了。
不客气。不过，如果我们尝试优化流动相中有机相比例的话，能接受么？
可以的，艾思吉老师，只要在药典允许的范围内条件即可。
好的，那我们换个思路，不使用Co-injection进样功能，只优化下有机相比例，看看对理论塔板数有没有影响。分别增大和降低有机相比例，我们都试一下。
降低有机相比例，也可以哒。
太好了，那这个方案适合仪器上没有Co-injection进样功能的时候。
溶剂效应解决办法
1、 用流动相做样品溶剂或降低样品溶剂的洗脱能力。
2、 增大流动相的洗脱能力。
3、 使用仪器的在线稀释
（Co-injection）功能。
4、 降低进样量。
5、 改变柱前管路规格：对于梯度洗脱而言，在不影响分离度的情况下，可以改用较粗内径的柱前管路。
注意：若是等度洗脱，此方法会降低柱效；若是梯度洗脱，基本不影响柱效
谢谢艾思吉老师，溶剂效应还能影响理论塔板数呢，真是涨见识了～
还有一个问题，供试品中有很多保留太强的杂质，我设置的分析时间一针80min，还是有杂质会残留到下一针，有没有好的解决方案。
可以在目标峰出峰后，加一段增大有机相比例到70%并冲吸一段时间，再回到初始流动相比例，这样能把保留强的杂质在较短时间冲洗出来。
这个方法太赞了，大大缩短了分析时间，提高了工作效率。
十分感谢。针对杜仲配方颗粒中松脂醇二葡萄糖苷的测定，帮我们建立了两个完整的解决方案。
方案01
色谱条件
对照品溶液色谱图及结果：
供试品溶液色谱图及结果：
方案02
色谱条件
对照品溶液色谱图及结果：
供试品溶液色谱图及结果：
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