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OD600的应用
OD600是指在600nm波长处的吸光度,常常被用于表示细菌液体培养液中的细菌浓度。在细菌连续培养过程中,在不同的时间点检测菌液的OD600值,然后以时间为横坐标,OD600为纵坐标,描绘细菌的生长曲线。结合生长曲线,可以评估细菌所处的生长阶段,进而可以确定合适的诱导表达或收获的时间点。
图1 大肠杆菌生长曲线
菌液是一种非均相的悬浊液,当入射光照射在菌液上时,光线被细菌(菌体)所散射,所以仪器检测到的“吸光度”实际上是由散射和吸收综合作用产生的,而不是如均相溶液中一般是由于溶质分子光吸收引起的。
当使用不同型号的设备来检测同一样本的吸光度时,可能会得到不同的OD600,这与仪器的光路设计有关。仪器的检测器与样本之间的距离(d)和检测器的大小(R)都会对吸光度产生影响。如图2所示,当检测器位于d1时,散射光可以被检测器接收到,此时吸光度较小,而当检测器位于d2时,光不能被检测器接收到,此时吸光度较大。
图2 菌液光散射的示意图(Stevenson et.al,2016)
图3 不同型号的仪器OD600检测结果(Stevenson et.al,2016)
因此当进行细菌菌株筛选、培养基优化、添加剂评估等需要比较微生物生长曲线的研究工作时,最好选择同一型号的设备进行实验,保证实验条件的一致性。
新芝生物MGC系列微生物生长曲线分析仪具有高通量培养、全自动检测、实时显示生长曲线的功能,将成为您科研路上的得力助手。
▲MGC系列微生物生长曲线分析仪参数表
参考文献
Stevenson K , Mcvey A F , Clark I , et al. General calibration of microbial growth in microplate readers[J]. Scientific Reports, 2016, 6:38828.
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