图1. 赛默飞一系列创新的抗体亲和层析方案，
助力抗体药物开发
赛默飞一系列创新的抗体亲和层析产品，为抗体领域亲和填料选择问题提供全面的解题思路。根据配基类型和结合特性的不同，赛默飞的抗体亲和填料分为三大类：
以 Protein A 配基为基础的 MabCaptureC 亲和填料，配基为 protein A 的 C domain 串联四次组成，保留了protein A 配基的 CH2-CH3 界面和 VH3 两个区域的结合能力。
以羊驼单域抗体配基筛选技术为基础，开发出了一系列可以结合 IgG 不同片段的特异性亲和填料。目前该系列配基已经商业化的产品有CaptureSelect CH1-XL, CaptureSelect Kappa XP，CaptureSelect Lambda XP，CaptureSelect FcXP 和 POROS CaptureSelect FcXP。
除此之外，同样以羊驼单域抗体配基筛选技术为基础，我们开发出了特异性结合 IgM、IgE、IgA 的亲和填料：POROS CaptureSelect IgM-XL 和 CaptureSelect IgE，CaptureSelect IgA。
接下来，让我们深入了解这个大家庭的每一位成员，看看他们有哪些性格特点。
MabCaptureC 是赛默飞于 2022 年上市的 ProteinA 抗体亲和层析产品，自上市以来，以其高性价比获得了生物制药领域同仁的广泛关注。这款填料的主要性能如下：
可结合在抗体 CH2-CH3 界面和 VH3 区域
高载量: 保留时间为 5 min 时单抗结合载量 > 55 g/L
配基碱稳定性：0.2M NaOH 条件下 > 100 cycles
其具体的载量表现如下：以 10% 流穿为例，在 6min 保留时间时，对于多克隆 IgG 的结合载量在60mg/ml 以上；在 5min 保留时间，对纯化后的 PD1（IgG4）的结合载量可以达到 70mg/ml 以上。
图2. MabCaptureC 结合多克隆 IgG 和IgG4 的 DBC
耐碱性测试：采用细胞培养上清为样品，每个循环的开始和结束分别用 0.2M NaOH 处理 15min，并且每 10 个循环用 0.5M NaOH 处理 15min。经过 100 个 cycle 处理后，收率基本保持不变。
图3. MabCaptureC 可以耐受 0.2M 碱处理 100 cycle 以上
除了收率外，也对配基脱落、HCP 及 SEC 纯度进行了检测。结果显示：100 个 cycle 后，MabCaptureC 配基脱落在 10 ppm 以下，SEC 纯度和 HCP 含量基本没有升高，证明其杂质去除能力在 100 个 cycle 过程中基本没有下降。关于该填料更详细的介绍请查看往期微信稿：
MabCaptureC 新型 Protein A 亲和层析填料高燃来袭！
图4. MabCaptureC 有着优异的纯化质量
另外，客户端大量的试用数据显示：MabCapture C 与市面上主流的 protein A 亲和填料在载量和收率方面可比，在纯化质量方面优于市面上其他的 Protein A 亲和填料，同时有着优异的性价比。
CaptureSelect 配基筛选技术：羊驼体内约一半的抗体仅有重链，且其 Fab 区域只有可变区。这种抗体结构相对传统抗体来说更加简单，容易进行基因反转录和克隆等操作。在开发抗体或片段特异性配基时，首先用目的样品免疫羊驼，得到特异性结合该目的样品的重链可变区（VHH区）。随后通过反转录得到该 VHH 区域的基因，在酵母中进行克隆表达，得到可用于商业化生产的无动物来源的配基，进一步通过化学方法将配基固定于琼脂糖基架上，就产生了特异性的亲和填料。通过 CaptureSelect 技术得到的配基均有相应的配基脱落检测 ELISA 试剂盒。
图5. CaptureSelect 配基筛选技术配基开发流程
CaptureSelect 技术于 1995 年问世，是一项非常成熟的配基筛选技术，除了一些商业化的填料外，还可以进行配基的定制开发。筛选得到的配基一方面可以偶联到填料基架上制成特异性的亲和填料，另一方面可以进行生物素化修饰，用做一系列分析方法的原材料：包含 ELISA，蛋白质印记及无标记检测平台，如表面等离子体共振，Bio-Layer 干涉法等。
目前通过 CaptureSelect 配基筛选技术得到的 IgG 抗体片段特异性亲和填料有以下四种：这个系列的填料具有结合特异性强、洗脱条件温和的特点，在合适的添加剂条件下，可以用高达 pH 6 的条件进行温和洗脱，对 pH 敏感的新型抗体更加友好。更重要的是，赛默飞于 2023 年对该类填料调整了价格策略，以更好地满足大家对这四款产品的需求，支持新型抗体市场的发展和客户不断增强的工艺开发需求。
图6. CaptureSelect 系列 IgG 抗体亲和层析填料
国际上已有多家大型制药企业采用该系列产品用于商业化及临床项目生产：如罗氏采用 FcXL (FcXP 上一代产品) 进行双抗的商业化生产；多家知名药企如 Lonza ，JCR，AstraZeneca，广泛采用 CH1-XL 用于大规模的项目生产，都有赖于这一系列填料的高特异性及温和洗脱条件为基础的优异性能。
FcXP 配基因其应用的广泛性，除了琼脂糖基架之外，也有偶联到 POROS 硬胶基架上的产品：POROS CaptureSelect FcXP，旨在在更高流速下获得更高的结合能力，直接从血清中纯化 IgG，或从其他复杂的生物材料中纯化 Fc 融合蛋白，同时保持卓越的洗脱特性。POROS 基架的大流穿内孔结构有助于更高效地纯化大生物分子。可以结合应用案例进一步理解这些产品的特点和优势，具体见往期微信稿：
强势返场 | CaptureSelect抗体特异性亲和填料再出发
上述产品的参数特征详见表1。
除了 IgG 特异性亲和填料之外，针对 IgE 和 IgM、IgA 同样开发了特异性的配基。CaptureSelect™ IgE 亲和填料专为纯化重组和血浆中的人源 IgE（免疫球蛋白 E）而设计。IgE 在人血清中存在的浓度很低，使得纯化 IgE 的难度非常大，需要特异性结合 IgE 的亲和填料来进行纯化。该产品性能参数见表1。
POROS CaptureSelect IgM-XL 是目前市面上仅有的以抗原-抗体相互作用为基础的 IgM 高特异性亲和层析填料，可以结合人源和鼠源样品。CaptureSelect IgA 亲和基质专为纯化重组和血浆来源中的人 IgA 而设计，可与 IgA1、IgA2、二聚体 IgA 和 S-IgA（分泌型 IgA）相结合。特异性亲和填料仅通过一步即可获得出色的纯度，具有高选择性和高产能的优势，支持稳健、快速和高效的纯化工艺开发。目前POROS CaptureSelect IgM-XL 和 CaptureSelect IgA 均为 RUO 级别，最大包装规格分别为 500ml 和 1L。这两种产品性能参数见表1。
表1. CaptureSelect 系列抗体亲和填料参数特点
以上赛默飞 CaptureSelect 系列填料配基均为自主研发，在酵母中表达，无动物来源，同时有配套的配基脱落检测试剂盒。除 POROS CaptureSelect IgM-XL 和 CaptureSelect IgA 目前是 RUO 级别之外，其他产品均为商业化产品。具有完备的法规支持文件，助力抗体项目快速研发及上市。
作为有着三十多年层析填料生产经验的供应商，赛默飞具有全面独特的抗体亲和层析解决方案，多样化的产品可以满足各种新型抗体的纯化需求。数十年的积淀造就了赛默飞在填料生产中卓越的批次间稳定性；优异的产品性能使赛默飞的层析产品在生物医药浪潮中乘风破浪，稳步屹立于潮头；完善的法规支持体系为客户申报临床和产品的顺利上市保驾护航。
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