核酸检测和定量是许多生物学研究的关键。由于具有更高的的准确性和灵敏性，Qubit系列荧光计（Qubit 4和Qubit Flex）被越来越多的实验室所采用。
原理
它采用荧光染料与特异的靶分子结合，只有当荧光染料与样本中的特异分子（dsDNA，ssDNA或RNA或蛋白质）结合时才会发出荧光信号，显著降低buffer中其他分子（盐、溶剂、洗涤剂以及游离核苷酸等）的对结果的影响。
在降低信号噪声的同时，还可准确测量稀释的样品。最少只需1μL样品，最低可以检测到10 pg/μL DNA或12.5μg/mL蛋白质。尤其适用于低浓度或者珍贵样品，或者对下游准确性要求高的实验，如NGS，qPCR，转染或显微切割等。
此外，如果使用两种染料：一种结合较大的完整和/或结构化 RNA，而另一种结合较小的降解 RNA，Qubit荧光计还可快速评价 RNA 的完整性和质量。
机型
目前提供2个机型，Qubit 4和Qubit Flex，其区别主要来自通量：Qubit 4一次检测一个样本，Qubit Flex一次可检测多至8个样本。
对于初次使用的用户，下面的视频将帮助你快速了解如何操作Qubit 4和Qubit Flex。
如何使用Qubit4荧光计进行样品定量？
如何管理Qubit 4荧光计样本数据？
如何使用Qubit 4荧光计的其他特性？
如何快速使用Qubit Flex？
对于操作中可能会出现的问题，以下问答供您参考。
Q:我是否每次都要用新的标准？
A:不需要。但是我们建议你在每次配置新的工作液时使用新的标准品。保证标准品和样品都是用同一批working solution 进行配制的。
Q:我是否需要校准Qubit Flex 荧光计的8个管子？
A: 不需要，你可以在测量样品的管子区域进行校准。可能需要将Qubit Flex荧光计固件版本升级到1.5.0或更新版本以启用此选项。
Q:稀释的标准品可以保存多久？如果随时间有蒸发怎么办（明显或不明显）？
A:如果一批样品使用相同的工作液，稀释的标准品可以使用至多3个小时。
Q:Qubit 荧光计可以对质粒进行定量吗？
A:可以。对于质粒小抽，DNA含量高（超过50 ng/μL ），推荐使用 Qubit DNA BR assay ；对于“质粒拯救（Plasmid rescue）”或其他方法获得的小量DNA，使用Qubit DNA HS assay。
Q:Qubit Protein Assay 在样品有去垢剂存在时是否可以正常工作？
A:可以兼容非常少量的去垢剂。请见 Qubit Protein Assay Kit product manual第6页表2的“Contaminants Tolerated by the Qubit Protein Assay,”了解具体的耐受数量。
Q:为什么紫外吸收读数比Qubit荧光计检测获得的数值高？
A:紫外吸收法不具有选择性，测定样品中所有分子在260nm处的吸光度，包括DNA，RNA，蛋白质，游离核苷酸，多余的盐等。而Qubit则通过特异的荧光染料结合目标分子，因此通常情况下总是比A260的读数更低。
Q:使用Qubit荧光计时，样品检测值随时间越来越低，造成这种现象的原因是什么？
A:请参考以下建议：确保孵育2分钟后上机检测读数（蛋白质样品孵育15分钟）。如果你将检测管留在仪器中，并反复读取多次，那么读数会变低，因为管壁在仪器内会被加热。如果您需要多次读取，请将检测管取出，放在试管架上，待其降至室温30秒后再上机读取。在避免光照的情况下，预混好的样品检测最好在3小时内完成。超过此时间，读数将不再准确。
Q:Qubit 荧光计可以储存多少行数据？
A:Qubit 4 荧光计至多可以储存1000个数据，Qubit Flex可以存储10,000个数据
Q:荧光计的光源可以用多久？我要如何更换？
A:在Qubit 4和 Qubit Flex荧光计里有2个LED 光源。正常使用预计可以使用至少5年。
Q:我已经有一台Nanodrop，为什么还需要Qubit荧光计？
A:Nanodrop 仪器采用紫外吸光法，不能区分DNA，RNA，游离核苷酸和其他污染物，因此读数偏高。此外，Qubit比NanoDrop更加灵敏，在低浓度范围精确性高出很多。NanoDrop分光光度计全光谱吸光度读数可以通过吸收峰显示是否有污染物存在，这对可能会受到污染物危害的下游应用领域非常有用。我们建议两个仪器一起使用，Qubit可以精确测量低浓度样品，而Nanodrop可以检测污染物。
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