测定蛋白核酸含量的应用方案(超微量紫外可见分光光度计)

美析仪器

2023.7.27

美析（中国）仪器有限公司

第一部分:实验原理

测蛋白质含量的原理

由于蛋白质分子中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，因此蛋白质有吸收紫外线的性质，吸收高峰在280nm波长处。在此波长范围内，蛋白质溶液的光吸收值(A280)与其含量成正比关系，可用作定量测定。

测核酸含量的原理

核酸及其衍生物，核苷酸、核苷、嘌呤和嘧啶有吸收UV的性质，其吸收高峰在260nm波长处。DNA浓度(ug/ml)=A260/0.024/L*稀释倍数(L为比色池厚度1cm)

第二部分：仪器及试剂

美析UL-1000超微量紫外可见分光光度计

标准蛋白溶液。结晶牛血清蛋白，预先经微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量，根据其纯度配制成1mg/ml蛋白溶液。

待测蛋白溶液

核酸溶液

第三部分: 操作步骤

绘制标准曲线

按下表分别向每支试管加入各种试剂，摇匀。选用光程为1cm的石英比色杯，在280nm波长处分别测定各管溶液的0A280值。以A280值为纵坐标，蛋白质浓度为横坐标，绘制标准曲线。

样品测定

取待测蛋白质溶液1ml,加入蒸馏水3ml，摇匀，按上述方法在280nm波长处测定光吸收值，并从标准曲线上查出待测蛋白质的浓度。

取待测核酸溶液1ml，加入蒸馏水3ml，测定核酸的浓度。

第四部分: 实验结果

测得的八个试管中溶液的A值如图所示

蛋白质样品的A值为0.063

核酸样品的A值为0.039

蛋白质含量

根据方程当A=0.063时，0.0630=0.6123c+0.0070

C=0.0945mg/ml.

因为溶液稀释了4倍，所以样品蛋白的浓度为

0.0945*4=0.378mg/ml

核酸含量

DNA浓度=A260/0.024/L*稀释倍数

=0.039/0.024/1*4

=7.8ug/ml

第五部分: 仪器参数

UL-1000超微量紫外可见分光光度计产品参数

1．产品简介

超微量紫外可见分光光度计是一类很重要的分析仪器 ,无论在物理学、化学、生物学、医学、材料学、环境科学等科学研究领域 ,还是在化工、医药、环境检测、冶金等现代生产与管理部门 ,超微量紫外可见分光光度计都有广泛而重要的应用。超微量紫外可见分光光度计就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器，常用于核酸，蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。超微量紫外可见分光光度计已成为现代分子生物实验室常规仪器

2．仪器特点

*检测所需样微量，最低只需0.5ul

*检测范围宽，比传统的分光光度计的上限高100倍

*对于多数样品而言，无需稀释

*机器无需预热，直接测量，无需检测容器，日常消耗低

*全波长190-1100nm，分辨率1nm，仪器都自动给出全波长的扫描结果190-850nm

*体积小巧，便携式包装，满足现场检测的需求

*通过PC控制实现更精确和灵活的测量

3．技术指标

*最小样本量：0.5μl

*光程：1mm/0.2mm

*波长范围：190～850nm

*波长精度：1 nm

*波长分辨率：≤0.3nm（FWHM 在 Hg 253.7nm）

*吸光率精度：2%（0.76 在 257nm）

*吸光率分辨精度：0.002Abs（1mm 光程）

*吸光率范围：0.02～300 (等效10mm光程)

*可准确测量范围：0.1～5 Abs. ±0.1Abs 5～80 Abs. ±2%

*侦测器：3648像素线性CCD阵列

*光源：微型氙气闪光灯系统

*测量时间：<5 秒

*尺寸：200mm×130mm×136mm（L×W×H）

*重量：≤ 2.0kg

*样本检测平台材质：304 不锈钢和石英

*输入电压：AC100～240V 50-60Hz

*操作电源功率：24W

第六部分:关于我们

上海美析仪器有限公司(以下简称美析)，是一家具有自主知识产权的高新技术企业，美析的创业理念“科技——因你改变”，并以此为企业宗旨，不断探究、果敢创新。特别是在分析测试仪器领域，不断开发出先进的产品，使美析成为优质仪器资源的供应者。

美析主营光谱类仪器：可见分光光度计、紫外可见分光光度计、原子吸收光谱仪、原子荧光光度计、ICP-AES、ICP-MS，生命科学仪器：超微量分光光度计、全自动核酸提取仪，目前，我们的产品已广泛应用于有机化学、无机化学、生物化学、医药、环保、冶金、石油、农业等领域。同时美析利用在产品机械结构、光学设计、电气应用和软件开发方面积累的丰富经验，结合市场的最新实际需求，近期将陆续推出一批全新的分析类仪器。

美析非常重视人才的引进和培养，人的因素是一个企业可持续发展的核心因素，所以美析充分尊重每一位员工，做到真正的“共建平台，实现自我”。为此美析建立了强大的培训团队，对在职员工进行全方位的培训，帮助员工制定职业生涯规划，以期公司和员工共同发展。同时美析以“家庭、敬业、学习”的职业操守启迪着员工，每一个美析人都以饱满的热情和专业的技能完，美呈现每一台仪器、服务每一位客户。对人才的重视和尊重使公司的各个环节都充满着严谨和激情，全新的设计理念、对高精度高参数的苛刻要求、应用范围的持续延伸，所有这些都在我们的产品先进性上得到了完美呈现；从原材料的严格验收，到各工艺流程的标准流水线作业，再到质检部门的严格出厂检测，美析人对生产各环节的苛刻要求使得公司建立起一套完善的过程质量控制系统，并在仪器的质量上得到有力体现。也因此使我们的产品受到国内外用户的一致好评。

美析的总部及生产基地设在上海，营销中心设在北京，并在上海、北京、江苏三地建有研发基地。为充分利用各地的智力资源，美析与国内外的部分科研单位也进行了深层次的科研合作，不断将科研成果转化为生产力。为更好的服务于广大客户，美析仪器国内设有12家办事机构，度身定制符合您需求的应用解决方案，提高产品的附加值。在不断服务国内用户的同时，美析也与20多个国家的分销机构建立了深度的战略合作关系。

伴随着美析跻身全球品牌仪器行列步伐的加快，美析对自身的要求不断提高，同时我们也希望能得到社会各界的关爱和支持，让我们携手共同展望。科技，必将因你我而改变。