细胞组分的化学反应实验_过碘酸雪夫反应(PAS)

2019.4.04

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实验方法原理	组织、细胞的多糖、粘多糖及粘蛋白等都可用PAS法来显示，其化学基础是利用过碘酸的氧化作用，打开碳链形成醛，生成的醛基与Schiff试剂中的无色品红反应形成紫红色化合物。
实验材料	小白鼠
试剂、试剂盒	PBS缓冲液丙酮二甲苯乙醇三氯醋酸固绿硫酸铜联苯胺混合液番红过碘酸酒精液 Schiff氏酒精液亚硫酸水苏木精 Carnoy固定液
仪器、耗材	光学显微镜解剖器材蜡盘载玻片吸水纸染色缸盖玻片水浴箱
实验步骤	一、方法 1. 取1~2 mm 厚的肝组织块，用Carnoy氏液4℃固定4~6小时。 2. 乙醇脱水、二甲苯透明。石蜡包埋，切片。 3. 用70%乙醇展片。 4. 脱蜡：二甲苯（1）5分钟→二甲苯（2）5分钟→100%乙醇5分钟→含1%火棉胶的乙醇液1分钟→70%乙醇1分钟。 5. 直接浸入过碘酸酒精液反应5~15分钟，经70%乙醇洗片刻。 6. 浸入Schiff氏酒精液反应15分钟。 7. 亚硫酸水洗三次，以洗去多余的非特异性结合的色素，以及扩散的染料。 8. 流水冲洗3~5分钟。 9. 蒸馏水洗。 10. 浸入Ehrlich苏木精复染20~30秒，使细胞核着色。 11. 脱水：95%乙醇3分钟二次→100%乙醇3分钟二次→二甲苯透明10分钟二次。 12. 加盖片镜检或树胶封固后镜检。二、结果细胞中呈紫红的颗粒即为糖原。展开

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