国家相关标准
1.样品前处理方法
称取10.0 g样品于50 mL烧杯中,加入20 mL水溶液,稀释混匀,待净化。
依次用3.0mL的正已烷+乙酸乙酯(1+1),3.0mL去离子水活化HLB小柱,待净化的样品6.0mL加至SPE净化柱,萃取过程需要在负压条件下进行,最后用6.0mL的去离子水洗涤提取容器,一并过柱,抽真空2 min,将小柱抽干;同时准备活化氨基-硫酸镁小柱,在LC- NH2氨基小柱中装入1/3高度的无水硫酸镁,用5 mL正已烷+乙酸乙酯(1+1)活化氨基-硫酸镁小柱,最后保持填料上剩余0.5 mL正已烷+乙酸乙酯(1+1)活化溶液;由上而下将HLB小柱(上)NH2小柱(下)进行串联,用15 mL正已烷+乙酸乙酯(1+1)分三次对串联小柱进行洗脱,并且洗脱开始时需要负压抽真空,以便洗脱进行,收集全部洗脱液于15 mL玻璃刻度试管,置于40℃下氮吹干,用甲醇:水为5:95溶解残渣,定容至1.0 mL,取上层清液供LC/MS/MS分析。
2. LC-MS/MS仪器条件
(1)液相色谱参数:
色谱柱:Phenomenex Synergi Fusion-RP 2.0X50mm,4um
流动相:A:水(含5mM甲酸铵) B:甲醇(含5mM甲酸铵)
柱温:30℃,流速:250μl/min;
流动相:A:水(5mM乙酸铵),B:甲醇(5mM乙酸铵);
梯度洗脱,洗脱条件见表1:
(2)质谱条件参数:
离子源:Turbo V™离子源;
扫描模式:正离子
采集模式:多反应监测MRM
以上质谱参数适用于AB SCIEX公司API TripleQuad 3200/4000/4500/5000/5500/6500以及QTRAP 3200/4000/4500/5500/6500型号仪器;
实验结果
多菌灵和甲霜灵总离子谱图如下:
结论
AB SCIEX提供的全方位解决方案,可同时测定葡萄酒中多菌灵和甲霜灵。