实验设计
针对通过随机肽库筛选得到的12肽段（ADGVGDAESRTR），先用Nicoya 公司的OpenSPR 独有的LSPR技术测定了CP与壳聚糖的结合亲和力；以混和肽作为阴性对照（S1），快速动力学参数分析发现CP是壳聚糖很强的特异配体，结合常数为5.27×10-8M（KD）（Figure1A）。获得的数据为下步实验设计开启了重要的第一步，同时通过分子动力学模拟进一步的研究表明，肽有利于与壳聚糖的相互作用。
之后在细胞水平评估了肽对真菌的靶向能力，荧光成像显示，C型隐球菌中FITC标记的CP处理组荧光明显高于混合肽处理的荧光，并且用游离壳聚糖预孵育可以完全抑制CP与真菌的结合，表明该CP作为靶向配体对新型C型隐球菌起作用。
然后再将CP偶联到带有ITZ药物的NP纳米载体上，构建成CP-NPs 及C-CP-NPs （与壳聚糖孵育），之后看Dil标记的NPs对真菌的靶向性，NPs与感染了表达GFP的C隐球菌的raw264.7巨噬细胞孵育，荧光成像发现，CP-NPs与DiI 信号重叠性很好，证实隐球菌链表面的超级壳聚糖与肽改造的NPs存在很强的相互作用，这种相互作用可以赋予复杂环境下药物传递系统的靶向性。
接着对比了C-NPs 及C-CP-NPs与NPs 及CP-NPs的细胞渗透效果，发现C-NPs 及C-CP-NPs可以穿过粘液层而NPs 及CP-NPs则停留在细胞表面，并且在肠道中也有很好的渗透效果，并且FERT 实验显示C-CP-NPs能在穿过肠道屏障进入循环系统后仍能维持结构的完整性。
进一步对感染C型隐球菌的动物模型，分别注射C-NPS和口服C-CP-NPS，定量影像分析发现，口服C-CP-NPS的小鼠肺部积累了大量ITZ药物，而注射C-NPs的小鼠肺部ITZ药物积累量相对比较少，因此，该结果证明口服C-CP-NPS不但能解决吸收阻碍的问题，还能很好的靶向真菌，并且MSI 成像发现，服用C-CP-NPS肺部感染后没有出现结节，肺部恢复很好，而未处理的小鼠肺部出现大量免疫细胞，肺泡间质增厚，从而突出了壳聚糖及其多肽配体在口服药物治疗中的必要性。
总结
本研究首先利用Nicoya OpenSPR 创新LSPR 技术，其操作简单，结果准确，检测不受缓冲液折率及温度变化影响，出结果速度快的特点，快速获得了CP与壳聚糖糖结合的动力学数据，从而确定了CP是壳聚糖很强的特异配体，为后面的实验设计提供必不可少的第一手数据，之后将CP与到ITZ药物纳米载体NP偶联，看其对真菌的靶向性效果，通过一系列的细胞及动物实验，确定了壳聚糖及其多肽配体在真菌药物靶向性的高效及必要性，从而为开发口服型靶向抗病原体药物提供了一个非常有前景的策略，将挽救更多人类！
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