Q Exactive Focus 结合 Compound Discoverer实现泮托拉唑杂质谱分析
关键词
药物杂质鉴定；Compound Discoverer；Q Exactive Focus；静 电场轨道阱高分辨质谱
1.引言
任何影响药物纯度的物质统称为杂质。人用药物注册技术要求 国际协调会（简称 ICH）对杂质的定义为药物中存在的，化学 结构与该药物不一致的任何成分。药物中含有杂质会降低疗 效，影响药物的稳定性，有的甚至对人体健康有害或产生其他 毒副作用。因此，检测有关物质，控制纯度对确保用药安全有 效，对保证药物质量非常重要。
质谱技术因其快速、高灵敏度和高专属性的分析能力，已经被广泛的应用于药物杂质鉴定，OrbitrapTM 静电场轨道阱高分辨 质谱具有超高的分辨率和长期稳定的高质量精度，可获得高质 量的一级和多级高分辨质谱数据，保证了鉴定结果的可靠性， 被越来越多的应用于定性分析中。
本文采用Thermo ScientificTM高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱 Q Exactive™ Focus 高分辨质谱联用技术对药物泮托拉唑进行 了全面的杂质数据采集，利用高性能四极杆对目标化合物进行 高专属性选择，HCD 高能碰撞池进行二级碰撞碎裂，Orbitrap 静电场轨道阱采集一级和二级高分辨质谱数据。结合 Thermo 新一代的智能小分子化合物分析软件 Compound Discoverer™， 以高度灵活的自定义方式制定了泮托拉唑杂质分析工作流程（ 图 1）。
图 1. 基于 Q Exactive Focus 和 Compound Discoverer 的杂质鉴定流程
2.实验条件
2.1 液相色谱条件：
仪器：Thermo ScientificTM UltiMateTM 3000 超高效液相色谱仪
色谱柱：Hypersil Gold C18 (100×2.1 mm, 1.9 µm)
流动相：A 为水相：0.1% 甲酸水；B为有机相：乙腈
梯度条件：
2.2 质谱条件
仪器：Thermo ScientificTM Q Exactive Focus 四极杆静电场轨道阱 高分辨串联质谱。HESI 离子源参数：Spray Voltage +3.5 KV、2.8 KV，快速正负切换；Sheath Gas Pressure: 40arb；Aux Gas Pressure: 10arb；Capillary Temp: 300℃；Heater Temp: 350℃
质谱扫描参数：全扫描范围 150–800 m/z，分辨率 70,000 FWHM；二级：Discovery 数据依赖自动触发；母离子隔离窗 口 0.4 amu、4.0 amu；分辨率 17,500、70,000 FWHM。
2.3 样品制备
取泮托拉唑影响因素样品适量，加乙腈：水（50:50）稀释至 0.2 mg/mL 后进样分析。
3．结果
3.1 Q Exactive Focus 提供优质、全面、高效的原始数据
3.1.1 快速正负切换提升化合物鉴定覆盖率
Q Exactive Focus 具有快速、高效的正负切换能力。以图 2 中 7.16 min 的色谱峰为例，正离子模式下检测到 336.11500 m/z 杂质的 [M+H]+ 信号，在负离子模式下除了检测到相应的 334.10177 m/z [M-H]- 信号外，还检测到另一杂质 320.08543 m/z 的 [M'-H]- 信号，表明快速的正负切换采集模式可以同时 获得正离子和负离子杂质的全面信息，同时由图 1 质量偏差可 见，无论是正离子还是负离子模式，Q Exactive Focus 都能保 持优秀的质量精度，为准确鉴定提供了有力的保障。
图 2. 快速正负切换检测不同性质杂质
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