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液相色谱耦联Q Exactive 台式轨道阱质谱仪分析利...(四)

2020.5.18
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

表 4 显示的是轻链、非糖基化重链和完整抗体的计算质量数,分别从轻链的 213 和重链的 451 位氨基酸开始逐步计算。两个蛋白序列都包含的 N- 末端谷氨酰胺应会被修饰为焦谷氨酸,这将导致质量数丢失 17.0265 Da。此外,重链中 C- 末端赖氨酸有可能被切掉,导致质量数丢失128.09497 Da。在构成完整抗体时,形成 16 个二硫键会丢失 32 个质子。两条重链上携带的糖链导致其质量数将会增加 1217.1-2352.1 Da。两条重链上可以携带不同的糖链,从而形成混合组成物,例如 G01/G2F。各个糖链的化学组成和质量数列在表 5 中。用于计算表 4 和表 5 中分子量的元素的单同位素和平均原子质量列于表 6 中。

 

表 4. 分别对带有不同修饰及不同糖型的利妥昔单克隆抗体的轻链和重链进行化学组成分析以及单同位素分子量和平均分子量的逐步计算。图 4、图 6 和图 7 的蓝色格子显示了检测到的分子量。

 

 

表 5. 单糖的化学组成和分子量


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