实验方法原理 提取DNA的一般过程是将分散好的组织细胞在含SDS（十二烷基硫酸钠）和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白质，再用酚和氯仿/异戊醇抽提分离蛋白质，得到的DNA溶液经乙醇沉淀使DNA从溶液中析出。

实验材料 细菌

试剂、试剂盒 TE氯化铯溴化乙锭NaCl乙醇CTAB

仪器、耗材 离心机摇床

实验步骤

1.  培养5 ml 的细菌培养物至饱和状态，取1.5 ml 的培养物离心2 min。

2.  沉淀物加入567 μl 的TE缓冲液，用吸管反复吹打使之重悬。

3.  加入30 μl10%的SDS和3 ℃ 20 mg/ml蛋白酶K，混匀，于37℃温育1 h。
 
4.  加入100 μl 5 mol/l NaCl充分混匀，再加入80 μlCTAB/NaCl溶液，混匀，于65℃温育10 min。
 
5.  加入等体积的氯仿/异戊醇，混匀，离心4~5 min将上清液转人一个新管中，如果难以移出上清，先用牙签除去界面物质。
 
6.  加入等体积的酚/氯仿/异戊醇，混匀，离心5 min，将上清液转入一只新管中。
 
7.  加入0.6体积异丙醇，轻轻混合直到DNA沉淀下来，用一个封口的巴斯德管将沉淀转移至1 ml 的70%乙醇中洗涤。
 
8.  离心5 min，弃上清，用冻干机稍加干燥，重溶于的下100 μl TE缓冲液，每次酶切反应用10~15 μl。