实验材料 藻酸盐

试剂、试剂盒 生理盐水无血清培养基CaCl2苯巴比妥钠葡聚糖

仪器、耗材 加样枪磁力搅拌器注射器研钵荧光酶标仪

实验步骤

1. 将藻酸钠溶于无菌生理盐水，终浓度为1.5%；

2. 收集培养的肿瘤细胞，用无血清的培养基洗涤1 次，将细胞沉淀重悬于1.5%藻酸钠溶液中；

3. 将上述肿瘤细胞悬浮液用1 ml 加样枪缓慢滴入磁力搅拌的250 mM CaCl2 溶液中，形成乳白色的藻酸盐小珠。继续静置于250 mM CaCl2 中30 min 即可使用。以上操作步骤均在无菌条件下进行；

4. 将第4 次免疫后7 天的小鼠用苯巴比妥钠0.1ml (按100 mg/kg 计) 腹腔注射麻醉，小鼠麻醉后置于解剖台上，切开背部皮肤，皮下植入4 粒藻酸盐包裹颗粒，缝合皮肤，外敷手术胶膜；

5. 天以后，小鼠经尾静脉注入100 μl (按100 mg/kg 计) FITC 标记的葡聚糖(FITCDextran)；

6. 20 min 后处死动物，取出藻酸盐颗粒，常温下加入1 ml 的生理盐水，剪碎研磨颗粒，再加入1 ml 的生理盐水,混匀标本，放置1 小时，1500 rpm 离心5 min。取上清液用荧光酶标仪测定；

7. 用不同浓度的FITC-Dextra n 制备标准曲线。