一、实验资料
1、检验药品
(1)检验药品的名称 头孢氨苄。
(2)检验药品的来源 市场购买或送检样品。
(3)检验药品的规格、批号、包装及数量 根据药品包装确定,并记录有关情况。
2、质量标准
(1)检验依据 《中国药典》(2010版)二部208页“头孢氨苄”:本品为(6R,7R)-3-甲基-7-[R-2-氨基-2-苯乙酰氨基]-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸-水合物。按无水物计算,含C16H17N3O4S不得少于95.0%。
(2)含量测定 照高效液相色谱法。
色谱条件与系统适用性试验:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以水-甲醇-3.86%醋酸钠溶液-4%醋酸溶液(742:240:15:3)为流动相;检测波长为254nm;取供试品溶液适量,在80℃水浴中加热60min,冷却,取20μL注入液相色谱仪,记录色谱图,头孢氨苄峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。测定法取本品约50mg,精密称定,置50mL量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取10mL,置50mL量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,精密量取10μL注入液相色谱仪,记录色谱图;另取头孢氨苄对照品适量,同法测定。按外标法以峰面积计算,即得。
二、实验过程
1、仪器、试药准备及试液的配制
1)仪器的准备
高效液相色谱仪、电子或分析天平(感量0.1mg)、容量瓶(50mL)、锥形瓶、移液管、玻璃棒、微量进样器(10μL)。
2)试药的准备
甲醇、醋酸钠、醋酸、头孢氨苄对照品。
3)试液的配制
3.86%醋酸钠溶液:取醋酸钠3.86g,加水使溶解成100mL,即得。
4%醋酸溶液:取醋酸4mL,加水适量使成100mL,摇匀。
2、检验过程
1)供试品溶液和对照品溶液的制备
(1)供试品溶液的制备 取本品45~5mg,精密称定,置50mL容量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取10mL,置50mL容量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,供试品溶液分别配制2份。供试品溶液在注入色谱柱前,一般应经适宜的0.45μm滤膜滤过。
(2)对照品溶液的制备 取头孢氨苄对照品45~55mg,精密称定,置50mL容量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取10mL,置50mL容量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀。对照品溶液分别配制2份。对照品溶液在注入色谱柱前,一般应经适宜的0.45μm滤膜滤过。
2)操作前的准备
(1)流动相的制备 取水742份,加甲醇240份,加3.86%醋酸钠溶液15份,加4%醋酸溶液3份,摇匀。制备好的流动相应经适宜的0.45μm滤膜滤过,用前脱气。
(2)检查上次使用记录和仪器状态 检查仪器是否完好,色谱柱是否适用于本次试验,色谱柱进出口位置是否与流动相的流向一致,原保存溶剂与现用流动相能否互溶,流动相的pH与该色谱柱是否相适应等。
3)操作
(1)开机 初始平衡时间一般约需30min。
(2)色谱条件和系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以水一甲醇-3.86%醋酸钠溶液-4%醋酸溶液(742:240:15:3)为流动相;检测波长为254nm;取供试品溶液适量,在80水浴中加热60min,冷却,取20μL注入液相色谱仪,记录色谱图,头孢氨苄峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。
(3)测定分别取供试品溶液和对照品溶液各10μL注入液相色谱仪,记录色谱图。供试品溶液和对照品溶液每份至少注样2次,由全部注样结果(n≥4)求得平均值,相对标准偏差(RSD)一般应不大于1.5%。按下式计算供试品含量,应符合规定。
式中 AR——对照品溶液主峰的峰面积
AX——供试品溶液的峰面积
mR——对照品的量
mX——供试品的量,单位与mR相同(按无水物计算)
色谱图同时应符合鉴别项下的规定:供试液的主峰保留时间与头孢氨苄对照品的主峰保留时间一致。
(4)清洗和关机 先关检测器和数据处理机。先用水,然后用甲醇-水冲洗,各种冲洗剂一般冲洗15~30min,特殊情况应延长冲洗时间。冲洗完毕,逐步降速至0,关泵,关电源。
4)结果判定
(1)结果判定依据 按无水物计算,含C16H17N3O4S不得少于95.0%。
(2)判定原则 如果含量计算结果在规定的范围内,则该项检查判为“符合规定”。
5)检验原始记录
6)检验报告书