用来鉴定细菌的生化试验有好多种,如碳源代谢试验、氮源代谢试验、碳源氮源利用试验、酶类试验、抑菌试验等。
1、碳源代谢试验
碳源是为微生物提供碳素来源的物质。用于合成菌体,碳源物质在细胞内经过一系列复杂的化学变化后成为微生物自身的物质(如糖类、脂质、蛋白质等),碳可占一般细菌细胞干重的一半。大多数碳源还能为机体提供维持生命活动所需的能源,因此,碳源物质通常也是能源物质。碳源代谢试验主要是通过检测细菌在利用碳源时的代谢途径及方式、利用碳源后所产生的特定的代谢产物等来鉴别细菌的生化试验,主要是试验各种糖类能否作为碳源被利用及其利用的途径和产物。常用的碳源代谢试验有糖(醇、苷)类发酵试验、甲基红试验(Methyl Red,MR 试验)、β-半乳糖苷酶试验(ONPG 试验)、乙酰甲基甲醇试验(V.P.试验)、葡萄糖酸氧化试验等等。不同的微生物对各种糖类的分解能力及其所产生的代谢产物各不相同,如大肠杆菌能发酵乳糖、葡萄糖,产酸、产气;伤寒杆菌只能发酵葡萄糖,产酸不产气。
2、氮源代谢试验
氮源为微生物生长提供氮源物质,如蛋白质类、氨及铵盐、硝酸盐、分子氮等,主要用来合成细胞中的含氮物质。由于不同微生物所含的酶不同,在利用氮源时会出现不同的代谢反应和产生不同的代谢产物,因此,可以利用生化试验来测定微生物对氮源物质的利用途径及代谢产物,从而对微生物进行鉴别。常用的氮源代谢试验有硫化氢试验、明胶液化试验、吲哚试验(靛基质试验)、氨基酸脱羧酶试验、精氨酸双水解酶试验、尿素酶试验等等。
3、碳源氮源利用试验
碳源氮源利用试验是细菌对单一来源的碳源和氮源利用的鉴定试验。在无碳或无氮的基础培养基中分别添加特定的不同碳化物或氮化物,观察细菌的生长状况,就可以判断细菌能否利用此种碳源和氮源,根据微生物对碳源和氮源物质利用的能力和代谢产物的差异,对微生物的种类进行区分。常用的碳源氮源利用试验有枸橼酸盐利用试验、丙二酸盐利用试验、乙酸钠利用试验、马尿酸钠水解试验等。
4、酶类试验
酶是生物体内细胞合成的生物催化剂,没有酶,生物体内的所有代谢反应都不能进行。常用的酶类试验有氧化酶试验、凝固酶试验、硝酸盐还原试验、卵磷脂酶试验(Nagler 试验)、磷酸酶试验等。
5、抑菌试
抑菌试验是用于验测定抗菌药物体外抑制细菌生长效力的试验。通过抑菌试验,不仅可以测定一个药物的最低抑菌浓度,同时还可以根据不同细菌的种类对不同抗菌药的敏感性和耐药性来对细菌进行鉴别。常见的抑菌试验有 Optochin 敏感试验、杆菌肽敏感试验、新生霉素敏感试验、氰化钾试验等。
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