①在正相条件下使用时,故障率较低。但要注意不可进样含有醛基、羰基的化合物,不可用于还原糖的分析;流动相要彻底脱气,并不得含有羰基化合物和过氧化物(质量较差的乙醚、四氢呋喃等溶剂中含有少量)。任何时候更换流动相时都要确保新流动相与柱子原保存液可互溶,若不互溶,必需用异丙醇过渡。
当使用氨基柱进行酸性物质分析时,酸性物质溶液有质子存在,会使略带负电荷的氨基官能团质子化,导致使用一段时间后被测成分保留性质有所改变或柱效下降。
这时,建议按如下方法处理:首先用异丙醇,以0.5ml/min流速,冲洗约50倍柱体积→然后用甲醇,以0.5ml/min流速,冲洗约50倍柱体积→再用异丙醇,以0.5ml/min流速,冲洗约10倍柱体积过渡,回到平常使用的正相流动相平衡2h,进样检测即可。
若上述方法不凑效,可尝试按以下程序冲洗与再生:首先用含0.5%～1.0%NH3的50%乙腈-50%水溶液,以11.0ml/min流速冲洗该柱约5～10倍柱体积→然后用不含NH3的50%乙腈-50%水溶液,以1.0ml/min流速冲洗该柱约5～10倍柱体积以洗去多余NH3→再用添加少许NH3(如0.1%)的酸性分析物的流动相平衡2h左右,进样检测即可。
②在反相条件下使用时,-NH2键会水解,尤其是在该柱子pH范围以外,在极端酸性和碱性条件下柱效会下降很快,所以故障率较高。
若出现柱压增高柱效降低等情况,建议采用如下方法处理:若流动相含有缓冲盐,先以流动相比例的水-有机溶剂,以检测分析时同流速冲洗约30倍柱体积→再用纯甲醇,以1.0ml/min流速冲洗约50倍柱体积→然后用异丙醇,以0.5ml/min流速冲洗约10倍柱体积过渡→再用二氯甲烷以0.6ml/min流速冲洗色谱柱约10倍柱体积→再用异丙醇以0.5ml/min流速冲洗约10倍柱体积过渡回到甲醇条件下,以1.0ml/min速冲洗约10倍柱体积,密封保存或用流动相平衡2h左右(若流动相含有缓冲盐,需先用与流动相同比例的水-有机相以1.0ml/min流速冲洗约30min),进样检测即可。
若上述方法不凑效,可尝试如下程序冲洗与再生:95%水-5%乙腈,以1.0ml/min流速冲洗约10倍柱体积→THF四氢呋喃),以0.6ml/min流速冲洗约10倍柱体积→95%乙腈-5%水以1.0ml/min流速冲洗约10倍柱体积→保持95%乙腈-5%水,以低流速0.2-0.5ml/min冲洗过夜→流动相平衡2h(若流动相含有缓冲盐,需先用与流动相同比例的水-有机相以1.0ml/min流速冲洗约30min),进样检测即可。
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