①在正相条件下使用时,故障率较低,操作和维护与氨基柱基本完全相同。但当柱子使用一定时间后,若出现柱效下降,柱子老化,可通过冲洗再生来恢复其柱性能。
具体方法如下:
用氯仿以0.5ml/min流速冲洗约10倍柱体积→再用异丙醇以0.5ml/min流速冲洗约10倍柱体积→然后用二氯甲烷以0.5ml/min流速冲洗约10倍柱体积→再用流动相(pH1.5-7.0为佳)平衡1h,待基线平稳,进样检测即可。
②在反相条件下使用时,-CN键会水解,尤其是在pH1.5-7.0范围以外,在极端酸性和碱性条件下柱效会下降很快,所以故障率较高。如果在这个条件下使用,一定要注意及时清洗。若出现柱效下降,柱子老化,可通过冲洗再生来恢复其柱性能。
具体方法如下:若流动相含有缓冲盐,先以流动相比例的水-有机溶剂,以检测时同流速冲洗约30倍柱体积→再用95%水-5%乙腈以1.0ml/min流速冲洗约10倍柱体积→再用THF(四氢呋喃)以0.6ml/min流速冲洗约10倍柱体积→再用95%乙腈-5%水以1.0ml/min流速冲洗约10倍柱体积→再用流动相平衡2h(若流动相含有缓冲盐,需先用与流动相同比例的水-有机相以1.0ml/min流速冲洗约30min),进样检测即可。
若上述方法不凑效,可尝试如下程序冲洗与再生:用95%水-5%乙腈以1.0ml/min流速冲洗约10倍柱体积→再用THF(四氢呋喃)以0.5ml/min流速冲洗约10倍柱体积→再用95%乙腈-5%水以1.0ml/min流速冲洗约10倍柱体积→保持95%乙腈-5%水继续冲洗,以低流速0.2~0.5ml/min冲洗过夜→流动相平衡2h(若流动相含有缓冲盐,需先用与流动相同比例的水-有机相以1.0ml/min流速冲洗约30min),进样检测即可。