游离脂肪酸的检测操作方法介绍

2022.5.02

认真做好每一件喜欢的事，把每一件要做的事都变成喜欢并认真去做的事

　　（1）混合试剂：

　　①试剂Ⅰ：含缓冲液Ⅰ 4.0ml、ATP 2.0ml、MgCl2 2.0ml、辅酶A 2.0ml、TritonX-100 4.0ml、酰基辅酶A合成酶2.0ml，加双蒸水4.5ml（共20.5ml）。

　　②试剂Ⅱ：含MES缓冲液10.0ml、4-氨基安替比林6.0ml、TBHB 8.0ml、NaN3溶液2.0ml、TritonX-100 4.0ml、过氧化物酶溶液0.4ml，双蒸水10.0ml（共40.4ml）。

　　③试剂Ⅲ：NEM缓冲液2.1ml、酰基辅酶A氧化酶2.0ml（共4.1ml）。

　　上述三种混合试剂4℃避光保存可稳定3天。

　　（2）各管内加入试剂Ⅰ1ml与试剂Ⅱ2ml，混合，37℃10min。

　　（3）加入空白与血清标本各50μl，混合后37℃5min，在546nm测定吸光度为A1。

　　（4）加入试剂Ⅲ 0.20ml，混合，待20～25min反应停止后在546nm测定吸光度为A2。

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