(1)混合试剂:
①试剂Ⅰ:含缓冲液Ⅰ 4.0ml、ATP 2.0ml、MgCl2 2.0ml、辅酶A 2.0ml、TritonX-100 4.0ml、酰基辅酶A合成酶2.0ml,加双蒸水4.5ml(共20.5ml)。
②试剂Ⅱ:含MES缓冲液10.0ml、4-氨基安替比林6.0ml、TBHB 8.0ml、NaN3溶液2.0ml、TritonX-100 4.0ml、过氧化物酶溶液0.4ml,双蒸水10.0ml(共40.4ml)。
③试剂Ⅲ:NEM缓冲液2.1ml、酰基辅酶A氧化酶2.0ml(共4.1ml)。
上述三种混合试剂4℃避光保存可稳定3天。
(2)各管内加入试剂Ⅰ1ml与试剂Ⅱ2ml,混合,37℃10min。
(3)加入空白与血清标本各50μl,混合后37℃5min,在546nm测定吸光度为A1。
(4)加入试剂Ⅲ 0.20ml,混合,待20~25min反应停止后在546nm测定吸光度为A2。