毛细管电泳SELEX 技术(CE-SELEX)技术筛选适配体的介绍

　　不同组分间的荷质比存在一定差异，导致物质的电泳迁移率有所不同，从而实现不同组分的分离。CE-SELEX 能在2-4轮内实现高亲和力适配体的筛选，常被用于筛选蛋白质、脂多糖、多肽等大分子物质。Yang等首次利用 CE-SELEX 实现了对小分子物质甲基吗啉的适配体的筛选，经过3轮筛选后获得了8条高亲和力适配体，其解离常数为到几百nM 到几uM，其中两条序列能够催化中卟啉的金属插入反应，催化强度分别为1.7倍和2倍。针对亲和力较弱的适配体与靶标体系存在动态解离平衡这一问题，科研工作者发展了平衡混合物的非平衡毛细管电泳(NECEEM)、平衡混合物的平衡毛细管电泳(ECEEM)和 Non-SELEX 毛细管电泳技术。Ashley 等应用 Non-SELEX 技术筛选获得过氧化氢酶的适配体，作者应用荧光分光广度计与毛细管亲和力电泳表征了其亲和力与特异性，结果显示适配体对靶标的亲和力比与其他四种蛋白的亲和力高至100倍，也显示了其高特异性。该适配体可应用于生物传感器、免疫印迹与生物标志物鉴定。Ashley 等又基于 NECEEM 和 SELEX 技术筛选获得在自由的三维空间环境的人类瘦素蛋白的适配体，其解离常数为几百 nM。