类器官培养方法的比较

类器官的来源广泛，样本材料经过不同方法处理后需要在体外进行培养，构建3D培养模型。不同细胞外基质可采用的培养方法也会存在差异，但都可以为类器官体外培养提供生长的微环境。其中VitroGel水凝胶为无动物源成分的功能性水凝胶，室温下与细胞培养基或含离子成分的溶液混合即可成胶，类器官培养方法多样；而目前使用较多的Matrigel或其它含动物源成分的基质胶，所有操作或者材料需要在冰上进行，且主要以圆顶（Dome）形式进行类器官培养。现对两类细胞外基质用于类器官培养的操作方法进行比较：

 2D包被培养

主要将细胞外基质先铺板粘附凝固后再将细胞添加在表面，细胞会通过基质表面的孔径渗入到内部，添加覆盖培养基后培养形成类器官。

 3D包裹培养

主要将细胞外基质与细胞悬液按一定比例混合，再转移到培养皿中，待形成软凝胶或固化后再添加覆盖培养基进行培养形成类器官。

 液滴式培养

主要利用VitroGel水凝胶的特性进行特有的类器官培养。水凝胶与细胞悬液混合后形成软凝胶后，仍具有流变性和一定的剪切力，允许以液滴的形式滴加在培养基中培养形成类器官。

目前，类器官培养技术正处于技术爆发和科研成果井喷的阶段，行业发展具有很大的前景，但挑战也是并存的。例如，大多数类器官本身不具备血管化的结构；如何在体外模拟肿瘤类器官与免疫细胞相互作用关系；类器官的重复性和一致性；以及类器官下游应用的准确性等。总之，新的技术不断涌现，助力再生医学与精准医疗领域的研究更上一层楼。