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关于红细胞裂解液的使用说明

2022.10.11
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coco5517

认真做好每一件喜欢的事,把每一件要做的事都变成喜欢并认真去做的事

  一、组织细胞样品:

  1.新鲜组织经胰酶或胶原酶等消化分散成单个细胞悬液,离心弃去上清液;

  2.从4℃冰箱中取出ELS裂解液,按1:3-5的比例向细胞沉淀中加入ELS裂解液(1ml细胞压积加入3-5ml裂解液),轻轻吹打混匀;

  3.800-1000rpm离心5-8分钟,离心弃去上层红色清液;

  4.收集沉淀部分,加入Hank’s液或无血清培养液离心洗2-3次;

  5.如裂解不完全可重复步骤2和3;

  6.重悬细胞,用于后续实验;如提取RNA,最好是于步骤4开始使用DEPC水配制的溶液中进行。

  二、血细胞:

  1.新鲜抗凝血,离心弃去上清液;

  2.取出4℃冰箱预冷的ELS裂解液,按1:6-10的比例向细胞沉淀中加入ELS裂解液(1ml细胞压积加入6-10ml裂解液),轻轻吹打混匀;

  3.800-1000rpm离心5-8分钟,离心弃去上层红色清液;

  4.收集沉淀部分,加入Hank’s液或无血清培养液离心洗2-3次;

  5.如裂解不完全可重复步骤2和3;

  6.重悬细胞,用于后续实验;如提取RNA,最好是于步骤4开始使用DEPC水配制的溶液进行。

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