可分为TP直接检查、梅毒血清试验及脑脊液检查。
1、TP直接检查
可取病灶组织渗出物、淋巴结穿刺液或组织研磨液，用暗视野显微镜、镀银染色、吉姆萨染色或直接免疫荧光检查等方法。
2、梅毒血清试验
梅毒血清试验是梅毒主要的检查方法和确诊的主要依据，分为非特异性试验（包括RPR、TRUST和VDRL试验）和特异性试验（包括TPHA、TPPA和FTA-ABS）。
非特异性试验为采用免疫学方法检测血清中的心磷脂抗体，作为梅毒的诊断筛选试验。本试验敏感性高而特异性低。阳性结果时，可初步诊断。定量试验是观察疗效、判断复发及再感染的手段。一期梅毒硬下疳出现后的2～3周内可出现假阴性。
特异性试验即梅毒螺旋体抗原血清试验，阳性结果可明确诊断。但常呈持久阳性，不可用于观察、判断疗效。
3、脑脊液检查
主要用于神经梅毒的诊断，包括白细胞计数、蛋白定量、VDRL、PCR和胶体金试验。一般不作为一期梅毒的诊断方法。
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