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罂粟果提取物的鉴别步骤及含量测定

2023.5.24
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xujinping

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  鉴别步骤

  (1)取本品约0.1g,加5%醋酸溶液5ml,振摇2分钟,用氨水调pH值约为9,用三氯甲烷-乙醇(9:1)10ml提取1次,分取有机层,置蒸发皿中,水浴蒸干,残留物加稀铁氰化钾试液,即显蓝绿色。

  (2)取本品约0.1g,加水2ml与氨试液数滴,用三氯甲烷10ml,振摇10分钟,分取三氯甲烷液,置蒸发皿中,水浴蒸干,残留物加甲醛硫酸试液2滴,即显深红色。

  (3)取本品约25mg,置锥形瓶中,加5%醋酸溶液5ml,超声处理5分钟,取出,滤过,取滤液,用氨水调pH值约为10,用三氯甲烷-乙醇(9:1)10ml提取1次,分取有机层,减压蒸干,残留物加甲醇1ml溶解,作为供试品溶液。另取吗啡对照品适量,用甲醇溶解并制成每1ml中约含吗啡1.0mg的溶液,照薄层色谱法(附录Ⅴ B)试验,吸取上述两种溶液各10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以乙酸乙酯-甲醇-氨水(85:10:5)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液,供试品溶液所显主斑点的颜色和位置与对照品溶液的主斑点相同。

  含量测定

  照高效液相色谱法(附录Ⅴ D)测定。 色谱条件与系统适用性试验 用辛基硅烷键合硅胶为填充剂,以0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-0.0025mol/L庚烷磺酸钠溶液-乙腈(5:5:2)为流动相;检测波长为 220nm。理论板数按吗啡峰计算不小于1000。固相萃取柱系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充物,以测定法中相同的处理条件和洗脱条件试验。精密量取浓度为每1ml中约含0.5mg的吗啡对照品溶液0.5ml,置处理后的固相萃取柱上,同法洗脱,用5ml量瓶收集洗脱液至刻度,摇匀。精密量取该洗脱液与含量测定项下的对照品溶液各10μl,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。

  洗脱液与对照品溶液色谱图中吗啡峰面积的比值应在0.97~1.03之间。 测定法 取固相萃取柱一支,依次用甲醇-水(3:1)15ml与水5ml冲洗,用pH 值约为9的氨水溶液(取水适量,滴加氨试液至pH值为9)冲洗至流出液pH约为9,待用。取本品约10g,研成粗粉(过80目筛),精密称取1g,置20ml量瓶中,加5% 醋酸溶液适量,超声处理30分钟使吗啡溶解,取出,放至室温,用55醋酸溶液稀释至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液0.5ml,置上述固相萃取柱上,滴加氨试液适量使柱内溶液的pH值约为9(上样前,另取同体积的续滤液预先试验,以确定滴加氨试液的量),摇匀,待溶剂滴尽后,用水20ml冲洗。以含10%甲醇的5% 醋酸溶液洗脱,用5ml量瓶收集洗脱液至刻度,摇匀,精密量取10μl,注入液相色谱仪,记录色谱图。

  另取吗啡对照品适量,精密称定,用含有10%甲醇的5%醋酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中约含吗啡0.05mg 的溶液,摇匀,同法测定。按外标法以峰面积计算,即得。

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