1.患儿侧卧位，一助手立于对侧扶持固定其手足，另一助手坐于患儿的头侧，双手分别固定患儿头部和躯干，使头颈略向前弯，与颈部、躯干方向一致。
2.以枕骨粗隆与第2颈椎棘突间凹陷的正中处为穿刺点，对准眉间的方向刺入皮肤软组织。
3.下一步穿刺有3种方法
（1）熟练操作者穿刺针进入软组织后，右手持针继续前进，左手不动，待阻力感消失（有突破感）时拔出针芯，可见脑脊液流出。
（2）当穿刺针进入外层组织后即拔出针芯，用双手拇指与示指扶稳穿刺针的接头，稳步前进，其他手指撑在患儿头颈部，以免针尖突进过深。当针尖刚进入延髓池时，即见脑脊液流出。
（3）开始程序同前，然后用双手拇指与中指持针，两示指分别撑在患儿的头颈部，方向不变徐徐前进，阻力感消失时，拔出针芯，也可先取掉针芯，视患儿具体情况而定。一般刺入深度为2～3cm，依患儿胖瘦而异。
4.留取脑脊液后无菌纱布压迫拔针，局部再次消毒，再以无菌纱布覆盖，胶布固定。
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