最近，基因毒性杂质NDMA的检测再次成了各大仿制药网页的热点话题。身为制药人的你有没有禁不住问一句：我做的品种里有没有这个基因毒性杂质？这个基因毒性杂质该怎么检测？
今天小编就给您打包奉上包含NDMA在内的13种亚硝胺类化合物的痕量级别的检测方法。
在介绍具体方案前，让我们先来看下NDMA的结构特点。
NDMA到底为何物？
N-二甲基亚硝胺，结构简式(CH3)2NNO，分子量74.08（缩写为NDMA），常被用作溶剂、有机合成中间体。通过动物实验，NDMA已经被确定为动物致癌物，靶器官主要为肝和肾。
但NDMA分子量小、亲水性强、需要检测的限度低，所以对检测方法提出挑战。沃特世提供的ACQUITY UPLC I-Class系统配Xevo TQ-S micro可以快速分析出13种N-亚硝胺类化合物，定量限达0.1 ng/mL。
沃特世解决方案的优势
沃特世提供的ACQUITY UPLC I-Class系统结合Xevo TQ-S micro检测具有选择性好、灵敏度高、分析速度快、重现性良好等特点。并且这个方法已经建立了包含完整液相色谱条件和质谱条件的Quanpedia数据库的方法包，只需要导入系统便可以直接使用。
LC实验条件
色谱柱： ACQUITY UPLC HSS T3；1.8 μm；2.1 x 100 mm
柱温： 40˚C
流动相A： 2 mmol 乙酸铵水溶液
流动相B： 甲醇
流速： 0.4 mL/min
MS方法
MS 系统：Xevo TQ-S micro
离子化模式：APCI+
电晕针：1μA
离子源温度：150˚C
脱溶剂气温度：550˚C
脱溶剂气流速：800 L/h
锥孔气流速：150 L/h
采集模式：MRM
检验结果讨论
方法灵敏度
在APCI正离子模式下，通过MRM的方式优化NDMA的灵敏度，结果如下图所示。当目标分析物浓度为0.1 ng/mL时候，NDMA的信噪比仍然大于10。
NDMA色谱图及其信噪比
方法重现性
ACQUITY UPLC I-Class的低扩散流路系统，结合亚2 μm小颗粒刚性填料色谱柱，保证了实验数据的稳定性。平行进样6针，经过MassLynx软件计算峰面积RSD%低于3.0%。
线性曲线
配置不同浓度的NDMA标样，分别为0.1 ng/mL、0.2 ng/mL、0.5 ng/mL、1.0 ng/mL、5.0 ng/mL、10.0 ng/mL、20.0 ng/mL。TargetLynx软件自动读取各浓度下的峰面积，建立浓度和峰面积的线性曲线，相关系数R²=0.9992，线性良好，定量结果可靠。校准曲线方程及相关系数结果见下图所示：
实验结论
在实验过程中，我们在ACQUITY UPLC I-Class Xevo TQ-S micro系统上建立了符合法规要求的13种N-亚硝胺类化合物的分析方法，并考察了实际模拟唾液基质的影响。
通过上述的实验结果，小编来总结下我们的应用优势。
以ACQUITY UPLC I-Class作为前段分离手段，大大提高了分析效率和样品通量，能有效节约溶剂成本。
方法以Quanpedia数据库为基础，用户只需添加化合物即可创建完整的定量UPLC/MS/MS分析方法。操作简单、快速。
TargetLynx软件直接定量样本中NDMA的含量，自动获得样本数据、处理并报告定量结果。还可以快速辨别落在用户定义或调整的阈值外的样本。
点击下方“阅读原文”，即可查看完整应用解决方案。
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