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如何减少新型冠状病毒检测假阴性/假阳性困扰?

德国耶拿生命科学部
2020.2.29

新型冠状病毒 (2019-nCoV) 简介

2019新型冠状病毒(2019-nCoV), 因2019年武汉病毒性肺炎病例而被发现,2020年1月12日被世界卫生组织命名。冠状病毒是一个大型病毒家族,已知可引起感冒以及中东呼吸综合征(MERS)和严重急性呼吸综合征(SARS)等较严重疾病。新型冠状病毒是以前从未在人体中发现的冠状病毒新毒株。

2019-nCoV在武汉被发现并快速在国内蔓延,为控制疫情蔓延,国家和各省市迅速采取控制措施,国家卫健委第一时间发布《新型冠状病毒感染的肺炎实验室检测技术指南》将核酸检测作为确诊的检测方法,大量检测试剂盒被快速研发出来并投入生产,并迅速用于一线的病毒检测。


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新型冠状病毒核酸检测过程中遇到的挑战

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检测任务量巨大,检测人员不足;检测人员临时培训上岗,专业度不够


核酸提取浓度不够,导致大量检测结果出现假阴性


病毒危害性大,检测过程也会带来传染


需要灵敏度更高的检测技术,在患者早期就能确诊

qPCR检测加样工作任务繁重,人工尤其是疲劳作业易造成加样出错而导致的假阴性、假阳性。


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德国耶拿新型冠状病毒

核酸检测解决方案

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德国耶拿公司拥有创新优质的产品、一系列高效的解决方案以及专业的技术支持和服务,在新型冠状病毒检测的各个工作环节,都能提供简单高效的实验工具,带来准确稳定、灵敏度更高的检测结果,有效减少检测结果的假阴性和假阳性。

一、新型冠状病毒检测流程

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高敏qPCR仪

新一代高敏检测器,0.1度精准控温,多重检测;

有效减少检测结果的假阴性。

高效DC核酸提取技术

处理样品体积更大(高至600μL),洗脱体积

更小(低至20μL),得率和浓度显著提高,提

取核酸片段更加完整,抑制剂残留更低,预封

剂防止交叉污染;

有效减少检测结果的假阴性和假阳性。

qPCR仪 set up自动加样工作站

轻松放置于生物安全柜/超净工作台,全自动加液,

多种灵活加样方式,整板高效率加样;

有效减少人工检样而导致的检测结果假阴性和假阳性。

qPCR加样工作台

小巧可随时移动,提供qPCR加样的清洁环境;

有效减少检测结果的假阳性。


二、高效的核酸提取技术

核酸提取是分子检测所有环节中最重要的一步,直接关系到检测结果的准确性。新型冠状病毒核酸检测主要检测的起始样本包括呼吸道样品拭子、血清、血浆、粪便等,耶拿可提供配套的提取试剂盒。

德国耶拿在核酸提取方面具有两项创新性的专利技术:

DC-Technology技术

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德国耶拿公司专利性的核酸提取技术Dual Chemistry Technology(双缓冲液技术),采用独特的缓冲体系,低盐结合低盐洗脱,为提取提供了温和的裂解环境,提高裂解效率,从而提高核酸提取得率;温和的化学环境,使得核酸遭受更少的化学剪切,从而获得更为完整的核酸片段。

Smart Extraction技术新一代核酸提取技术

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耶拿公司专利性的全新一代核酸提取技术Smart Extraction,该技术提取过程无需酚/氯仿、无需离子交换、无需离心柱、无需硅胶膜、无需磁珠,仅需tip上下吹打即可完成。提取得到的核酸得率高、纯度好,操作简单,速度快,易于实现自动化。

德国耶拿innuPREP-Virus DNA/RNA kit是一款通用型试剂盒,可以满足擦拭子、血清、血浆、粪便、组织等各类样本来源的病毒RNA提取,高达600μL的起始提取样本量,低至20μL的洗脱体积,可以有效提高病毒核酸的浓度和得率,提高下游定量检测的灵敏度。


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从150μL(红色)和300μL(黑色)样品中提取病毒RNA

定量PCR检测结果显示提高起始样本里可以提高检测灵敏度 


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针对不同起始体积的样本有不同的优化程序

同样的起始体积,可提供标准,快速及超快速提取模式

全自动核酸提取仪InnuPure C16 touch/Cybio Felix 可实现1-16/1-96个样本的自动化提取,使得提取过程自动化、标准化,避免人为误差,有效防止交叉污染。

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InnuPure C16 touch

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Cybio Felix
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完全封闭的系统,避免外部环境污染

☞ 带滤芯的Tip,避免移液头污染

☞ 预装密封的试剂条/板,避免试剂分装污染

☞ UV灯灭菌,避免样本批次间污染

☞ 操作简便,5min即可完成上机前准备

☞ 样品提取效率更高,即使是极少的病毒含量也可以实现更灵敏的检测

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三、高灵敏定量PCR

检测

检测灵敏度高:独有的白色、蓝色、绿色、红色四个高效LED固态光源,专利性的光纤扫描系统,带来极高的检测灵敏度,减少假阴性结果

▶  温控精准、运行快速:镀金纯银样品槽,8 ℃/s的变温速率,±0.1 ℃的温控准确性,带来快速准确的检测结果,结果稳定,并有效缩短实验时间,提高检测效率

▶  多重检测:四通道的标准配置,无需校正通道,可实现病毒四重目的基因的同时检测

▶  操作简单:中文操作界面,简单易上手,上下游的实验数据结果可方便记录在软件中,实现实验报告的信息化管理和实验信息的溯源

▶ 售后保障:对仪器的光学元器件提供十年质保,为顺利开展繁重的检测工作提供售后保障

▶ 开放平台:适用于各种新冠病毒qPCR检测试剂盒和反应管耗材

A公司两重新冠病毒检测试剂盒的结果

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FAMORF 1ab

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VIC:N基因

B公司三重新冠病毒检测试剂盒的结果

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FAMORF 1ab

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HEX:内质控
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ROX:N基因

C公司四重新冠病毒检测试剂盒的结果

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FAM:RdRP
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HEX:N基因

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Texas Red:E基因

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Cy5:内质控




四、新型冠状病毒核酸检测qPCR 体系构建

新型冠状病毒核酸检测有大量的液体处理工作。人工操作耗时费力且易出现错加、漏加或多加的情况,影响结果准确性。CyBio系列自动化移液系统提供多种型号满足以上各个环节的不同需求,帮您解放人力,提高效率,保证结果准确性。



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CyBio-SELMA

CyBio-Felix

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CyBio-GeneTheatre



  CyBio-FeliX 是一款功能灵活、性能卓越的自动化移液工作平台,满足各种类型的qPCR体系构建、板内/板间移液、分液、稀释、混合等各种液体处理工作

●   CyBio-SELMA 一款灵活好用,小巧便携的液体工作站,可置于生物安全柜中使用,96/384孔板的整板去PCR体系构建及梯度稀释。 

●   CyBio-GeneTheatre 是一款全自动液体处理工作站,在应用上具有高度的灵活性,不仅可以处理标准微孔板,还适用于联管、单管,可进行全自动的微孔板移液、批量酶联免疫反应体系构建、样品的梯度稀释和洗涤、母板-子板复制转移等液体处理工作。


五、新型冠状病毒全自动核酸检测系统 

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☛ 自动化操作,最大化解放人工,消除人为错误

☛ 集核酸提取、PCR Set upqPCR检测与一体

☛ 整合最先进的SE核酸提取技术和DC核酸提取技术

☛ 整合检测灵敏度最高的qTOwer atuo qPCR仪

☛ 兼容Elisa试验液体处理


六、样品质控、病毒灭活、PCR加样

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超微量核酸蛋白测定仪

Scandrop2

核酸质控—

高通量检测核酸浓度、纯度等

恒温震荡孵育器

病毒灭活—新型冠状病毒灭活

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UVP PCR HEPA Workstation

PCR加样—桌面式PCR加样平台


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