色谱分析之假阳性的烦恼

小伙伴们，

小编又来帮你解决烦恼了。

从事色谱分析检测的各位小伙伴，

有没有被下边这些事情折磨过：

谱图怎么这么乱啊，

被样品谱图搞得晕头转向，

到底有没有我要检测的目标物啊？

哇，这个样品里目标物有出峰，

怎么办，是真的吗？

会不会是假阳性啊？

相信很多小伙伴都遇到过假阳性的样品，是不是很烦恼，作为一个合格的检测分析人员要做到正确识别假阳性，做出合理分析，给出我们刚正不阿的报告，不放过一个不合格样品，也不冤枉一个合格的好产品。

在气质和液质分析中通常可以参考质谱谱库或者目标物的特征离子辅助我们进行定性，判断是否假阳性，但在更普遍的气相和液相分析中则主要依靠保留时间进行定性，产生假阳性的概率就会偏大一些。今天小编就以红参中有机氯农药的检测（GC-ECD）给各位小伙伴梳理下假阳性判断的一些方法和思路。参照《中国药典》2015版一部 红参部分修订公示稿中的方法进行实验，具体色谱条件如下图。那么如何进行定性和假阳性分析呢，我们下边一步一步进行介绍。

不同类型的气相毛细管柱有着不同的固定液，不同的固定液使得毛细管柱有着不同的极性和不同的分离性能，所以相同的目标物在不同极性的毛细管柱上可能有不同的保留时间，利用这种特性我们可以使用两根色谱柱进样我们的样品然后进行对比判断是否有假阳性。标准中给出了两根色谱柱进行分析验证，一根是以14%氰丙基苯基二甲基硅氧烷为固定液的色谱柱，为中等极性的色谱柱，另外一根是以5%苯基甲基硅氧烷为固定液的色谱柱，为弱极性的色谱柱，下图给出了一个常见气相色谱柱的导视图，以供各位小伙伴进行参考。

我们使用CD-5（30m*0.32mm*0.25μm）这跟验证柱再重新进样我们的标品和样品，以进行假阳性分析，对比谱图如下所示。

我们从图中可以看出，使用CD-5验证柱分析，样品空白中在艾试剂和顺氯丹的保留时间没有出峰，说明在CD-1701柱子出的峰为假阳性，杂峰在CD-5色谱柱上和目标物得到了有效分离。再来分析氧氯丹，在CD-5色谱柱上氧氯丹和外环氧七氯B无法有效分离，保留时间一致，均为13.9min，样品空白在13.9min也有一个小峰出现，我们在前边使用CD-1701色谱柱分析时样品空白中没有检出外环氧七氯B，所以可以确定样品中没有外环氧七氯B检出，那这个峰真的是氧氯丹吗？小编认为不是，我们可以仔细分析谱图，从峰高和峰型比较，小编推测样品空白在CD-1701上出现的“氧氯丹”峰在CD-5色谱柱上应该是14.8min的峰（图中黑色圆圈），而不是氧氯丹和外环氧七氯B保留时间处的峰，因此推测样品空白在CD-1701和CD-5色谱柱上的“氧氯丹”均为假阳性。但这只是小编推测，是否真的是这样呢，且看小编继续分析。

改变气相色谱条件中的流速，压力，升温程序等可以使不同的目标物在色谱柱中的保留性能发生变化，因此保留时间也发生变化，进而可以对比排除样品的假阳性。

标准方法中使用的是恒压模式，我们还是使用CD-1701色谱柱，将恒压模式改为恒流模式，流速1.5mL/min，然后重新进样标准品和样品空白，得到对比谱图如下：

从图中可以看出，在改变流速后，原来样品空白中出现的“氧氯丹”峰出峰时间往后偏移，在加标样品中可以明显看出杂峰和氧氯丹得到了分离。

所以综合分析，样品空白中的艾试剂、氧氯丹和顺氯丹均为假阳性检出。除了以上的一些方法，我们还可以通过更换不同的仪器检测进行假阳性判断，比如使用气相色谱质谱联用仪分析帮助我们进行辅助定性，确定样品中是否检出目标物。

小编通过一个具体的实验介绍了在日常色谱检测分析中假阳性分析判断的一些方法和思路，希望可以帮助到一些正在为此烦恼的小伙伴。