氨基酸是细胞培养基质中重要营养成分, 是影响细胞生长和生物制剂生产的关键质量属性。为了优化工艺产量、药效、安全性和质量一致性,整个制剂研发生产过程中,会监测细胞培养基中氨基酸水平,故迫切需要建立稳定可靠的LC-MS法定量和分析氨基酸的流程。
LC-MS分析氨基酸极具挑战
氨基酸化合物极性很强,很难在反相色谱柱上保留
同分异构体很难分离
HILIC模式下氨基酸保留更好,但分析结果重复性较差
本文采用Phenomenex bioZen Glycan(PN 00D-4773-AN,100mm*2.1mm,2.6um)在LCMSMS上开发了细胞培养基质中38种氨基酸的非衍生化定量分析方法。由下图展示可知,HILIC色谱柱上极性大的氨基酸保留和异构体的分离佳,日间与日内重复测试、不同进样体积、不同批次等各种条件下分析结果稳定。Phenomenex bioZen Glycan是非常适合分离非衍生氨基酸的色谱柱。
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