上周小编为大家介绍了如何挑选合适的GPC色谱柱，今天小编继续为你介绍与之相关的常见问题及解决方法，助力大家无忧使用GPC色谱柱。
在介绍常见问题及解决方法之前，我们首先了解一下GPC数据处理原理：
1️⃣ 用已知分子量的标样标定出流出时间和分子量的关系；
2️⃣ 用标定好的时间和分子量的关系曲线，对未知样各个流出级份的时间（分子量）和强度进行统计计算，得到分子量分布曲线；
3️⃣ 选用窄分布标准样（多分散性PD<1.1）；
4️⃣ 洗脱体积标示于峰高处；
5️⃣ 做出校准曲线: Log(M) = f (Ve)。
几个窄分布标样可以混合在一起，以快速地建立一条标准曲线，但是要注意：
■ 一个混合标样不要超过3个窄标，并且注意浓度；
■ 一个混合标样内的3个窄标间的分子量至少相差一个数量级，以获得良好的分离效果。
注: 如果未知物与标准物不是同一类高聚物，则分子量仅仅是相对分子量。
在了解了GPC数据处理原理之后，我们就来看看GPC色谱柱的常见问题及解决方法。
校正曲线注意事项
沃特世解决方案
曲线拟合形状通常选择五次方拟合。近几年的研究表明，对校正GPC柱来说，这种拟合方式被认为是较好的，因为它最接近柱子的实际情况，标曲点数少于10个可以选择三次方拟合。
注意❗：五次方拟合会发生和一次方及二次方拟合一样的问题，即曲线两端以外的点没有保证。
聚合物样品制备注意事项
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聚合物溶液越稀越好，这样可以防止粘度效应和保留时间不重现的现象。稀溶液可以允许聚合物充分展开，进入最松弛的构造，无链纠缠，不形成微胶。进样体积：小于100 μL/每根色谱柱（7.8 mm ID）。
建议的样品浓度：
溶剂使用注意事项
沃特世解决方案
做GPC的流动相要尽量使用色谱纯试剂，其他能过滤的溶剂或液体尽可能过滤；在有柱子的时候尽量不要把气泡带进。
■ 使用THF(四氢呋喃)时：
需要注意溶剂中水含量及过氧化物的含量。水和过氧化物含量过高，会降低色谱柱寿命和结果的重现性。新购买的THF通常含有稳定剂（抗氧剂），这种THF经过滤即可使用。抗氧剂的存在可以抑制THF中过氧化物的可能生成，从而减少过氧化物对系统的可能侵害，延长密封垫寿命。
■ 使用DMF时：
有时需要添加50 mM的LiBr以消除电荷效应，并且要严格除水。
■ 使用氯仿体系时：
由于氯离子对管路有腐蚀作用，因此需要将管路钝化。
■ 水相GPC体系：
盐也可以用于水相GPC，因为色谱柱中的甲基丙烯酸凝胶带有负电荷。由于填料带有负电荷会与阴离子样品发生离子排斥，与阳离子样品发生离子吸附。使用硝酸钠盐，可以大幅度减小这些影响，以及当与阳离子样品发生任何离子交换作用时减少对洗脱液pH值的调整。
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