在药物分析中，色谱图出现鬼峰是经常会碰到的问题之一。鬼峰的来源有很多，如流动相、样品瓶、残留等。偶然出现的鬼峰，通常很难排查。本文将结合实例为您介绍如何排查可重现鬼峰的来源。
当出现鬼峰时，首先可通过Empower软件中“进直接样品(Inject Immediate Samples)”或“进直接标准样品(Inject Immediate Standards)”功能（见图一），检查污染是否来自进样系统。该功能无进样动作，仅是记录当前色谱条件下的流动相基线。结合进样0 μL（有进样动作），可排查鬼峰可能来源，见图二。
图一
图二
若是样品污染，可分别考察是稀释剂原因还是样品在样品瓶中放置时发生降解。对于前者，新配稀释剂即可；对于后者，要考察样品在不同稀释剂及不同材质样品瓶中的稳定性。尤其是样品瓶材质，样品溶液长期放置时可能会导致样品降解。
图三. 样品在样品瓶中放置时发生降解 (摘自Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 140 (2017) 281–286)
若是系统污染，建议更换对样品溶解性更好的洗针液（Needle Wash），沃特世仪器通常使用90%甲醇或乙腈的水溶液作为洗针液。
若是流动相污染，可根据如下思路排查鬼峰是来自流动相中的缓冲盐、添加剂、水还是有机溶剂？在此也提醒大家，当使用小颗粒色谱柱时，一定注意使用试剂的品质，其品质好坏对色谱柱寿命将直接产生影响。
若是色谱柱污染，建议结合色谱条件及样品性质，调整色谱柱清洗方法。若分析方法中最高比例有机相偏低（如仅到40%），建议每隔30-40针左右即梯度冲洗色谱柱。
但一定要注意使用试剂的品质。如图四，客户反馈新色谱柱使用有干扰鬼峰。沃特世实验室检查发现，连续运行三针乙腈/水空白梯度，高比例有机相下的杂质峰明显减少，这表明之前使用的试剂中可能含有较多杂质，并会累积在柱内。
图四
综上，当分析过程中碰到鬼峰时，可结合Empower软件功能，逐步排查鬼峰来源，只有找到其根源才能将其彻底消除。
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