前处理过程参考兽药多残留的方案《Oasis PRiME HLB-UPLC-MS/MS测定动物源性食品中168种兽药残留》用80%乙腈水溶液(含0.2 %甲酸)作为提取液后,过PRIME HLB固相萃取柱后,得到了更好的净化效果。相比于常规酶解的方法,更简单易操作,具有更低的定量限0.25 μg/kg,同时加标回收率达到90%以上。
提取:分别准确称取2 g鸡肉样品两份,置于50 mL具塞离心管中,加入100 μL浓度为1 μg/mL的混合同位素内标液,准确加入80%乙腈水溶液(含0.2%甲酸)10 mL,旋涡振荡,置于水浴超声10 min,涡旋振荡后, 4000 r/min常温离心5 min,静置后,取上清液待净化。
净化:取Oasis PRiME HLB(PN:186008057,6cc/200mg)固相萃取柱,无需活化与平衡,吸取约2.0 mL上述离心上清液,过固相萃取柱,收集滤液后,过0.2 µmGHP滤膜(WAT097962),装入1 mL样品瓶,供液相色谱-串联质谱仪测定用。
仪器条件 — 色谱条件:
仪器系统:ACQUITY UPLC I-Class system
色谱柱:BEH Amide Column,1.7μm, 2.1×100 mm,(P/N:186004801 )
流动相:A — 水,B — 乙腈
流速:0.4 mL/min
柱温:40 ℃
进样量:1 μL
仪器条件 — 质谱条件:
仪器系统:Xevo TQ-XS质谱仪
电离模式:ESI+
电离电压:3.0 KV
脱溶剂气:流量650 L/hour,温度350 ℃
MRM检测参数见下表:
利巴韦林色谱图
1ng/mL利巴韦林及内标利巴韦林-13C5色谱图