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生物探索 | 当蛋白遇见色谱分离科学(二) - 聚集体分析

艾杰尔飞诺美
2020.7.24

在蛋白的整个开发生产过程中,聚集体是非常容易观察到的产品相关杂质,它的出现会影响免疫原性,因此也是生物制剂研发、工艺开发和生产阶段的重要评估指标。SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)、CE-SDS(毛细管凝胶电泳)、SEC(尺寸排阻色谱)等手段常用于重组蛋白的聚集体与片段的测试,而其中SEC(尺寸排阻色谱)不仅可以检测聚集体、单体和片段的占比,也会给出其他反应蛋白性质的信息。

飞诺美2018年推出了优秀的1.8μm bioZen SEC色谱柱,采用高惰性的热改性硅胶与BioTi金属硬件,适合蛋白分离的孔径分布设计,在达到良好分离能力的情况下,更大程度减少差异,批次重现性较高,同时BioTi硬件的使用大大减少不锈钢色谱柱预饱和次数,帮助提升工作效率和延长色谱柱寿命,是UHPLC-SEC的良好利器。

01

有效改善蛋白与不锈钢硬件间次级吸附

如下图所示,同样样品分别进入不锈钢硬件与BioTi硬件的SEC色谱柱,BioTi在进样5针后即可达到稳定的峰面积,而不锈钢硬件则需要进样20针才可稳定。由此可见,BioTi硬件大大降低与蛋白间的非特异性吸附,减少预处理操作,提高效率,同时更有助于结果的稳定性。

02

良好的空隙体积确保优秀的分离能力

SEC的分离能力与其空隙体积有很大关系,而下图则展示了飞诺美bioZen SEC-3的较大空隙体积,进而呈现更好的分离能力。

飞诺美SEC产品拥有丰富的产品系列,不仅有上面提到的专为生物制剂研发的bioZen系列,还有久经考验的水溶性Yarra系列以及BioSep系列。如需了解更多生物领域色谱技术信息,欢迎关注艾杰尔-飞诺美【生物制药】专题版块,或

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