当蛋白遇见色谱分离科学（四）- 糖型分析抗体与荧光试剂的净化

前几期我们分享了蛋白分析所需的bioZen WCX、SEC、C4色谱柱，本期为大家带来抗体糖型分析过程中抗体与荧光标记试剂净化的产品 – bioZen Glycan Clean UP 96孔板和Agela Cleanert Hilic。

N-糖基化是生物制剂尤其mAb上最常见的翻译后修饰，聚糖结构会影响药代动力学、药效学和免疫原性，因此糖基化是生物制剂的关键质量属性，N-糖的表征与糖型分析则是生物制剂研发生产过程中必不可少的部分。

2020版药典通则和指导原则新增内容 - 3130单抗N糖谱测定法。其中糖型分析的样品处理操作如下：

a. N糖的酶切，主要是为收集聚糖，采用PNGase F糖苷酶

b. 蛋白去除和N糖标记，获得相对纯度的糖并进行标记，乙醇醇沉法去除蛋白，2-AB标记聚糖，使得聚糖在检测器上获得更好的灵敏度

c. 标记后的N糖纯化，标记时标记试剂是过量的，上机检测前去除标记试剂有助于建立稳健的方法，采用凝胶过滤和固相萃取法。

艾杰尔-飞诺美提供完整的96孔板和萃取小柱与设备用于标记后N糖纯化。bioZen Glycan Clean UP采用创新的固相萃取（SPE）Hilic固定相，擅长保留和回收标记的N-糖链，为高通量样品荧光试剂的去除设计；Agela Cleanert Hilic固相萃取小柱，久为中国生物制剂企业所使用，体现较稳定的产品与良好的回收效果。

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96孔板完整套装

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Agela Cleanert Hilic固相萃取小柱套装