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色谱峰分叉

基泰生物
2020.12.10

色谱峰分叉

分叉

色谱峰

保护柱阻塞或污染

复杂的样品基质容易造成保护柱阻塞或污染,进而产生色谱峰分叉的现象。

解决方法: 取下保护柱再进行分析,如有必要可更换保护柱。

分析柱阻塞或污染

色谱柱在开始使用时没问题,而使用一段时间后出现峰分叉的现象,很可能是由于色谱柱阻塞或者被污染引起。

解决方法:如果分析柱阻塞,一般入口被阻塞的可能性较大,建议更换筛板或更换色谱柱;若分析柱被强保留物质污染,根据污染物质的物化性质选择适当的清洗再生措施。

色谱柱填料塌陷

色谱柱通常都有其适用的pH、温度范围,例如硅胶基质填料的色谱柱pH耐受范围一般为2-8,推荐使用温度不超过40℃,若使用不当会造成色谱柱填料塌陷,从而导致色谱峰分叉。

解决方法:由于柱填料塌陷引起的色谱峰分叉很难修复,建议更换新的色谱柱。

样品溶剂不溶于流动相

对于反相色谱,若使用100%有机溶剂或100%强溶剂,大体积进样时将使色谱峰过早的洗脱出色谱柱,导致峰变形。

解决方法:改变样品溶剂。如果可能,采取流动相作为样品溶剂。

接头连接不正确

如果连接色谱柱时选用的连接头不配套,色谱柱虽能固定住但管线与柱头仍有一定空间,涡流导致峰前延或分叉。

解决方法:更换配套的连接头

样品过载

进样量超过柱容量时,尤其在使用小体积色谱柱时,也可能会出现峰分叉的现象。

解决方法:减小进样量

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