色谱柱寿命一直是药物分析工作者关心的一个问题，结合我们的经验发现，很多色谱柱柱寿命短会伴随着压力升高的现象，尤其是小颗粒色谱柱，正确判断压力升高来源是延长色谱柱寿命的一个重要问题。本文为大家举例说明如何排查色谱柱压力升高的来源，并有哪些措施可预防压力升高。
实例分享
如下色谱柱（ACQUITY BEH C18, 1.7 μm 2.1×100 mm）在使用过程中发现所有峰出现分叉现象。
沃特世实验室按照出厂COA中的色谱条件复核发现，该柱丙酮及二氢苊峰均分叉，压力升高约2,000 psi，而将色谱柱反接测试发现峰形正常，柱效约为出厂COA中的80%，柱压略高于出厂；该现象说明色谱柱入口端可能有堵塞从而导致柱压升高，进而影响了色谱柱性能。
色谱柱的COA报告
沃特世实验室复核测试
鉴于上述案例，我们该如何准确判断柱压升高的来源并将其纠正，这会帮助延长色谱柱的寿命，大家可参考如下方法~
Tips
◆ 色谱柱压力突然升高：首先检查您的样品形态。对于复杂的中药提取物或制剂样品，建议离心后(10,000 rpm,10 min) 再过滤，并确保样品澄清。
注意:中药提取物有时会有析出现象，如果您的样品在进样器中排队会长达几个小时（尤其样品室温度设置较低），您就有必要留意检查，您的样品瓶内是不是有絮状出现。
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备注：请注意针式过滤头与样品稀释剂的兼容性!
◆ 色谱柱压力逐渐升高，但不进样压力就不继续上升：说明压力升高还是来自样品，需注意样品前处理，同时加强色谱柱清洗，当样品量大时建议分析过程中每隔30-40针清洗一次色谱柱。
色谱柱柱体积
◆ 若是不进样，色谱柱压力也在慢慢上升：问题可能出在流动相(检查是否有微粒或者长菌)。
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注意:
✔ 要使用高品质的水、缓冲盐、有机溶剂及滤膜/过滤头；
✔ 纯水相/缓冲盐溶液每24-48h需要新鲜配制并且连瓶更换(不应该存放后再次过滤，更不应该使用旧瓶，长菌会首先发生在瓶壁上）
✔ 常用水相的溶剂滤头需要定期清洗更换；
✔ 有机相不要往瓶内不断添加；
✔ 每周停机前，按照缓冲盐→水→甲醇的顺序灌注并冲洗管路后保存在甲醇或甲醇/水中。
对于复杂的样品分析而言，UPLC又快又好，优势十分明显，大家越来越倾向使用UPLC或者UHPLC技术。但是小颗粒色谱柱因其筛板目数更小(UPLC色谱柱0.2 μm筛板 vs HPLC色谱柱2 μm筛板)，来自于中药样品溶液以及流动相的微小颗粒更容易堵塞色谱柱，从而导致柱压升高或峰变形。为了让您的中药分析能够做得又快又好，您需要增加多道保护防线！
◆ 请使用0.2 μm过滤头及滤膜（注意检查确保滤膜材质与样品稀释剂的兼容性）
◆ 请使用保护柱及在线过滤器~
备注：长度为150 mm的UPLC柱，仅可使用保护柱或者在线过滤器。
沃特世在线过滤器及VanGuard保护柱产品表：
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