【微学堂】报告基因检测 | 药物活性检测的关键技术之一（内含教程视频）

报告基因法

报告基因法是通过分子生物手段将报告基因整合入待测的生物系统中，继而通过检测报告基因产生的信号，研究特定生物学过程的方法。在实际操作中通常是将报告基因与目的基因或调控序列连接，如将报告基因置于特定启动子调控序列之后，研究某种条件下启动子的调控或特定基因调控下目的蛋白的表达。作为报告基因，其序列和功能通常已知且其表达产物易于被检测。

报告基因的种类很多，根据对其表达产物的分析检测方法的不同，可将其分为体外报告基因和体内报告基因。体内报告基因的分析需要在含有报告分子的细胞裂解液或者细胞/组织培养液中进行，此类报告基因为分泌性报告基因，如氯霉素乙酰基转移酶基因（CAT）、人生长激素基因（hGH）及分泌型碱性磷酸酶基因（SEAP）等。体外报告基因则可以在活的细胞或组织中进行，如绿色荧光蛋白基因（GFP）。而 β-半乳糖苷酶基因（β-Gal）和萤火虫荧光素酶基因既可以在体外分析也可以在体内分析。

报告基因法在药物活性筛选中的应用

药品有效性必须是疗效确切，且含有特定的有效活性成分及一定的浓度含量。在药物研发的过程中，为了评价药物的有效性和临床应用价值，生物学活性的测定是重要的手段之一。现阶段的生物学活性分析方法主要是在体外检测，大多以细胞为基础进行研究。近年来，随着生物药物的快速发展，报告基因法逐渐应用于生物药的生物学活性检测之中。通常是在充分理解药物分子药理机制的基础上，构建相应的细胞模型，通过激活待测药物参与的信号通路产生生物效应，从而反映药物的生物学活性。

以干扰素为例，早在 2015 年版的《中国药典》中，报告基因法就已被收录为 Ⅰ 型干扰素活性测定的标准方法之一。除干扰素外，重组人促红细胞生成素，促胰岛素分泌肽融合蛋白，血管内皮生长因子抗体，程序性凋亡受体 Ⅰ 型抗体等生物制品也相继建立了报告基因的生物学活性检测方法。

注：该表仅列举了部分典型药物的生物学活性检测方法。

报告基因法用于生物活性检测的优势

如何使用 SoftMax Pro 软件

设置报告基因检测的方法

下面的视频以最常见的荧光素酶和 GFP 报告基因介绍软件的设置方法

*视频时长：6’44”

**流量预警：38.7MB

以荧光素酶报告基因的检测为例，在软件内单击 Setting，依次选择 LUM，Endpoint，

样品分组设置方法参考前述介绍内容，设置完成后点击 Read 进行数据的读取。