在日常色谱分析实验过程中，
您有没有遇到过结构相似化合物的分离难题？
通常是如何解决的呢？
今天小编就给大家介绍一件神秘武器
——Ascentis® Express F5色谱柱。
Ascentis® Express F5 U/HPLC色谱柱填充稳定的五氟苯基丙基反相固定相，由于存在负电性的氟，其苯环缺电子，除π-π和温和的立体作用力外，五氟苯基固定相还可通过极性相互作用对化合物进行保留。具备极性和非极性特性，五氟苯基固定相表现出双模式保留行为，依据流动相中乙腈含量的函数得到一种“U 形” 保留行为，即保留会在低和高浓度乙腈（反相和HILIC 保留模式）下均有所提高。Ascentis® Express F5适用于碱性、酸性或中性化合物分析，并可提供相对C18的正交选择性。
Ascentis® Express F5参数
硅胶： | B型（高纯度硅胶） |
填料类型： | 表面多孔颗粒（SPP） |
固定相： | 五氟苯基丙基硅烷 |
粒径： | 2.0 µm / 2.7 µm / 5.0 µm |
孔径： | 90 Å |
碳载量： | 5.3% / 5.5% / 3.9% |
表面积： | 120 m²/g / 135 m²/g / 90 m²/g |
pH范围： | 2 - 9 |
低pH时的最高温度： | 60 °C |
高pH时的最高温度： | 40 °C |
封端： | 是 |
相比于C18，F5 表现出更强的碱性化合物保留和更低疏水性化合物保留
适用于正相、HILIC 和纯水相应用
固定相稳定，柱流失低
结构接近的化合物的分析
氢化可的松和泼尼松龙结构相似，仅有一个双键之差。虽然它们溶解度接近，形状差异却十分显著。下面这个应用实例展示了使用C18和F5固定相对它们（包括泼尼松内标（IS））进行分离的结果对比。显然，由于增强的立体选择性，五氟苯基相可以对这些结构类似的化合物进行分离。
色谱条件 | |
色谱柱： | Ascentis® Express F5，10 cm x 4.6 mm, 2.7 µm（53590-U） |
Ascentis® Express C18, 10 cm x 4.6 mm, 2.7 μm (53827-U) | |
流动相： | [A] 水；[B] 甲醇 |
流动相比例： | A:B 50:50, v/v |
流速： | 0.8 mL/min |
温度： | 35 °C |
系统压力： | 2400 psi |
检测器： | 紫外 波长240 nm |
进样量： | 5 μL |
样品： | 溶于10%甲醇水溶液，每种10 μg/mL |
在反相和HILIC模式下
对司来吉兰和苯丙胺的分离
HILIC是多模式保留机理，可提供与反相机理正交的选择性，Ascentis® Express F5 对司来吉兰和苯丙胺的色谱分离结果可证明此点。司来吉兰在HILIC条件下会最后发生洗脱，但在反相条件下则会首先发生洗脱。因此，司来吉兰主要通过RP分配作用进行保留，而苯丙胺主要通过离子交换保留。
色谱条件 | |
色谱柱： | Ascentis® Express F5, 10 cm x 4.6 mm I.D., 2.7 µm (53590-U) |
流动相： | [A] 10 mM乙酸铵，pH 4.0，含乙酸；[B] 乙腈；（20:80, A:B - HILIC），（40:60，A:B - 反相） |
流速： | 0.6 mL/min |
压力： | 260 bar (2300 psi) |
温度： | 35 °C |
检测器： | MS ESI (+), SIR m/z 136, 150, 188 |
进样体积： | 2 µL |
样品： | 溶于甲醇，10 µg/mL |
首页
