细胞外囊泡(Extracellular Vesicles; EVs)是由细胞中释放出来的小囊泡。近年来的研究表明,EVs含有mRNA和miRNA,并具有细胞间的信息传递功能。特别是直径在30~150 nm的EVs,也就是外泌体(Exosome),已被发现与细胞的活性化、不活性化以及免疫调控有关。另外,由于癌细胞的EVs与细胞转移及癌变有关,所以除了在诊断和治疗预后阶段可作为肿瘤标志物进行检查以外,研发人员还对其是否可应用于给药系统进行着相关研究。
▼ 细胞外囊泡的种类及来源
Ref: Journal of Japanese Biochemical Society 91(4): 514-518 (2019)、doi:10.14952/SEIKAGAKU.2019.910514
EVs的分离纯化常会用到液相色谱法,其中尺寸排阻色谱最受关注。下表中列出了分析、分离EVs时使用的色谱分离模式和特点,以及适用的TSKgel SEC色谱柱。
当分离较小的EVs或外泌体时,可使用G4000SWXL色谱柱。分离较大的EVs时,可使用G6000PWXL、G5000PWXL等产品。
下图是使用G6000PW色谱柱分离EVs的色谱图。该EVs的大小是123nm。
下图是使用G4000SWXL色谱柱分离EVs的色谱图。其中馏分P1被识别为外泌体,大小为55~65nm。
最后,小编还将TSKgel色谱柱分析细胞外囊泡的相关文献,以及与EVs有关的总论和指南都整理了出来,我们提供了原文链接供大家查阅,点击下方“阅读原文”可查看。
参考文献:
1. Z. Varga et al., Towards traceable size determination of excellular vesicles, J. Extra cell. Vesicles, 3 ( 2014) 23298, CCBY, https://doi.org/10.3402/jev.v3.23298
2. S.S.Tan et al., Therapeutic MSC exosomes are derived from lipid raft microdomains in the plasma membrane, J. Extracellular Vescicles, 2 (2013) 22614, CC BY, https://doi.org/10.3402/jev.v2i0.22614