色谱分析VS质谱分析

基泰生物

2022.7.26

作者上海基泰生物科技有限公司

TA的动态

色谱分析

质谱分析

色谱组成

质谱组成

高效液相相色谱仪的组成：

高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统、数据处理系统。

质谱仪的组成：

真空系统、进样系统、离子源或电离室、质量分析器、离子检测器。

色谱特点

质谱特点

液相色谱法不受样品挥发性和热稳定性及相对分子质量的限制，只要求把样品制成溶液即可，非常适合于分离生物大分子、离子型化合物，不稳定的天然产物以及其他各种高分子化合物等。

高压、高速、高效、高灵敏度、高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。

分析范围广，质谱分析可对气体、液体和固体等直接进行分析。

灵敏度和分辨率高，高分辨质谱分析可测定微小的质量和微小的质量差值，质量小到10-24g（1个原子量单位）都能分辨得相当清楚，两个粒子间的质量差值为几十万分之一克就可分辨得很好。它可以精确地测定样品分子的摩尔质量，推测样品的化学式、结构式乃至同位素的丰度比。

用样量少，分析速度快。质谱分析时的样品一般只需1mg左右，极限用样量仅为几微克。完成一个样品的分析过程只需几分钟

色谱组件说明

质谱组件说明

流动相的要求：

流动相不与色谱柱发生不可逆化学变化，以保持柱效或柱子的保留性质较长时间不变;对待测样品有足够的溶解能力；与所用检测器相匹配；粘度尽可能小，以获得较高的柱效；流动相纯度要高，价格便宜，毒性小。

进样系统要求：

良好的密封性，最小的死体积，最好的稳定性，进样时对色谱系统压力、流量影响较小。

分离系统：

色谱柱是实现分离的核心部件。由柱管和固定相组成。柱管为直型不锈钢管。一般色谱柱长5~30cm，内径4~5mm，凝胶色谱柱内径3~12mm，而制备色谱柱内径则可达25mm。一般淋洗溶剂在进入色谱分离柱之前，先通过前置柱。HPLC柱的填料颗粒粒径一般约为3~10m，填充常采用匀浆法，色谱柱的发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。

检测系统：

作用——用来连续监测经色谱柱分离后的流出物的组成和含量变化的装置。紫外-可见吸收检测器、光电二极管阵列检测器、示差折光检测器、荧光检测器、电化学检测器。

真空系统作用：

是减少离子碰撞损失，若真空度低：大量氧会烧坏离子源的灯丝；会使本底增高，干扰质谱图；引起额外的离子-分子反应，改变裂解模型，使质谱解释复杂化；干扰离子源中电子束的正常调节；用作加速离子的几千伏高压会引起放电等。

进样系统目的：

高效重复地将样品引入到离子源中并且不能造成真空度的降低；间歇式进样系统——气体及低沸点、易挥发的液体;直接探针进样——高沸点的液体、固体；色谱进样系统——有机化合物。

电喷雾源结构：

喷嘴(金属毛细管)，雾化气，干燥气。

原理：喷雾蒸发电压。

特点：ESI是最软的一种电离方式，只产生分子离子，不产生碎片离子；适用于强极性，大分子量的样品分析，如，肽，蛋白质，糖等；产生的离子带有多电荷，尤其是生物大分子；主要用于液相色谱-质谱联用仪，既用作液相色谱和质谱仪之间的接口装置，同时又是电离装置。

四级杆质量分析器：

特点：结构简单，体积小、重量轻，扫描速率快，适合与色谱联机