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直播预告 | 一文get 超滤关键工艺参数

颇尔中国
2023.1.06
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在按照工艺要求选定好超滤系统硬件/软件和膜包之后,还需要优化超滤操作的关键操作参数,以实现超滤步骤的高效,达到高载量以及高流速的同时保证更高回收率以及样品纯度(病毒载体、脂质体等)。主要操作参数通常有进口流速,跨膜压力,最佳洗滤点优化等。

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相关超滤参数

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跨膜压力(TMP):跨膜压力为进料口和回流口压力平均值减去滤出口的压力(单位:bar/psi)

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TMP = (PF + PR) / 2 – PP

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压差:压力降,定义为进料口压力减回流口压力(单位:bar/psi)

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切向流速(CF):通过并平行于膜表面的流体速度(单位:L/min)

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切向流率(CFF):单位膜面积通过并平行于膜表面的流体速度。(单位:LMH,L/ m2/h)


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提高切向流速可以增加对膜表面的清扫效应,缓解浓差极化,增加透过流量。但高切向流速也会带来较高的剪切力,需考虑样品的耐受性,更大的切向流量需要配置更大的泵和管路,从而增加硬件成本和系统死体积。切向流速与膜包结构和筛网类型也有关,供应商针对膜包特点,会给出推荐的切向流速,例如 PALL T-series 系列超滤膜最优的切向流速为 5-8L/m2/min,微滤 10-20 L/m2/min(悬浮筛网),但基于一些敏感样品的稳定性也可低于推荐范围,PALL T-series 系列超滤膜低切向流速为 3L/m2/min。更多细节可参考相应供应商对应的验证指南及操作指南,结合样品特征以及过滤工艺时间要求,采用满足工艺要求的流速。


*浓差极化:溶质分子在接近或膜表面的堆积。比膜标称 MWCO 大的溶质分子被膜截留,而小于孔道的溶质分子可以自由或部分透过膜。


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除了优化切向流速,跨膜压也是至关重要的参数。在恒定切向流速的前提下,可以对跨膜压力进行优化。在该过程中 FLUX* 与 TMP 的关系分两个阶段,第一阶段为膜控制区,即 TMP 增加,FLUX 随之增加;第二个阶段是凝胶层控制区,这一阶段受到浓差极化的影响,FLUX 随 TMP 的增加幅度大幅减缓甚至不再增加。因此,最佳 TMP 值应该选择在第二阶段出现之前的一段区间,此时 FLUX 已经处于较高水平,且 TMP 也不会非常高,从产品耐受、工艺时间以及节约能源方面都是最优选择。以 FLUX(滤出速度)vs TMP (跨膜压力)作图(图1):


*FLUX:透过流速


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图1:FLUX vs TMP 示意图


此外,对于孔径较大的膜,为了防止浓差极化过早出现,还需要对透过端进行控制,比如微滤的浓缩。


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洗滤是超滤工艺中相对较难平衡的一个点。在高浓度时洗滤,所需缓冲液体积较小,但通量逐渐下降,而且因为浓度变化较大,有可能对样品稳定性存在影响。在低浓度时洗滤,通量较高,但洗滤体积较大,洗滤时间也较长。如何在浓缩因子、洗滤体积和处理时间中寻找一个最佳平衡点,是洗滤工艺的关键。经验的做法,可以参考如下经验公式:


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举例来说,如果 Cwall为134g/L,则最佳洗滤浓度为 134/2.718 (49g/L)。可以通过记录浓缩过程中通量与浓度的数据作图(图2),得到 Cwall。Cwall 为透过端通量衰减为 0 时的样品浓度。


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图2:通量对浓度作图


最佳洗滤点通常是一种理想状态,实践中通常选择最佳洗滤点附近区间的浓度都可以满足工艺的要求。



为了帮助大家更好地了解超滤(切向流技术一种)工艺开发,颇尔将于1月11日(下周三)晚19:00带来更深入的介绍。此次将会重点介绍:什么是切向流过滤技术?作为典型的切向流过滤产品-膜包,我们应该如何正确操作和使用?颇尔自动化台面超滤系统已重磅上市,本期交流会也会详细介绍它如何为工艺开发带来更友好的使用体验?期待与大家共同探讨和学习。


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颇尔将为您带来:

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课程主题:

切向流过滤技术及超滤操作介绍

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课程时间:

1月11日(周三)19:00-20:00

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课程要点:

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TFF 基本原理、应用和产品

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TFF 的常用参数、超滤技术的操作方法及注意事项

· 

颇尔台上超滤系统介绍


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  讲师介绍:

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汪雪玉

 颇尔技术专家

毕业于中国农业科学院,在生物制药领域有 6 年的工作经验。2019 年加入 Pall 公司生命科学技术中心,目前主要负责中国华北区域相关过滤、纯化及分离等技术支持工作,具有生物制品下游澄清,超滤,除菌,除病毒等方面的工艺研究和放大生产经验。



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