ABI贴士 | Ask Taqman（二）：参比染料ROX

每次做荧光定量PCR

小编设置时都会把ROXTM改成None

听说过ROXTM

却从不知道它是什么？

它重不重要？

您是不是也有这样的问题

就让我们一起来看看Doug Rains怎么说的

↓↓↓↓↓

原来ROXTM是参比染料

和SYBR Green类似，是一种荧光分子

可以被仪器检测到荧光信号

However

ROXTM的荧光信号值保持不变

其实ROXTM很重要

实验过程中很多因素会引起孔间差异：

不均匀的照明

孔与孔之间光学因素（液滴、气泡）的因素

反应体系的浓度不同

……

ROXTM就是为了对这些因素进行标准化

从而提高数据精度

影响ROXTM的系统差异会以同样程度影响报告基团

▼

标准化的报告基团的荧光测量值Rn公式

Rn=

真相大白

小编再也不敢不加ROXTM了

ABI提示

1.赛默飞提供的荧光定量PCR预混液已经包含了最佳浓度的ROXTM，无需添加或优化，可直接使用

2.所有的ABI实时荧光定量PCR软件都默认检测ROXTM并用ROXTM标准化，如果没有使用包含ROXTM的预混液，记得要把参比染料改成None

如果您有关于荧光定量PCR的问题，请继续关注Ask Taqman系列，ABI希望为您答疑解惑。

下期内容

您知道PCR的不同时期吗？